| GSTP1在先天性巨结肠症中蛋白质表达谱、甲基化检测与表达分析 |
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| 引用本文： | 高红,伍美,张志波,姜中佳,苏真伟,黄英.GSTP1在先天性巨结肠症中蛋白质表达谱、甲基化检测与表达分析[J].国外医学：分子生物学分册,2010(3):199-205. |
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| 作者姓名： | 高红 伍美 张志波 姜中佳 苏真伟 黄英 |
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| 作者单位： | [1]中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室,沈阳市110004 [2]中国医科大学附属盛京医院小儿外科,沈阳市110004 [3]沈阳帅范大学生化学院生物科学系,沈阳市110032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No.30772277） |
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| 摘 要： | 目的 利用双向凝胶电泳-基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）技术进行先天性巨结肠症（hirschsprung disease,HD）中蛋白质表达谱的研究;寻找HD中的生物标志物,为临床HD的早期无创性诊断提供依据.方法 分别提取20例HD患者配对狭窄段及正常段肠管组织的总蛋白质,进行双向凝胶电泳、银染,两组凝胶图像差异分析,得到差异蛋白质.对目的谷胱苷肽-S-转移酶1（glutathione S-transferase pi,GSTP1）蛋白质进行MALDI-TOF-MS质谱分析.运用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测HD中GSTP1基因启动子区5′端 CpG 岛甲基化程度与表达.采用荧光实时定量PCR方法检测HD中GSTP1基因的mRNA 转录水平.结果 获得了分辨率较高的HD狭窄段及正常段肠管组织双向凝胶电泳图谱;得到阳性结果的差异蛋白质谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione S-transferase,GST）.MSP 检测48 例HD,其中狭窄段肠管组织GSTP1基因高甲基化41例;而正常段肠管组织GSTP1基因甲基化仅7例.HD狭窄段肠管组织GSTP1基因mRNA表达低于正常段肠管组织（P〈0.05）.结论 利用双向凝胶电泳-MALDI-TOF-MS质谱技术检测HD组织差异蛋白质所获得的GSTP1蛋白可为寻找HD早期诊断的分子标记物提供理论依据;GSTP1基因异常甲基化、表达与HD的发生发展相关.
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| 关 键 词： | 先天性巨结肠症 谷胱苷肽-S-转移酶 基因的表达与调控 |
Analysis of Protein Profile and Expression and Detection of GSTP1 Methylation in Hirschsprung Disease of Tissues |
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| Authors: | GAO Hong WU Mei ZHANG Zhibo JIANG Zhongjia SU Zhenwei HUANG Ying |
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| Institution: | 1. Key Laboratory of Congenital .Malformation Reseach, Ministry of Health, Shegjing Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang, 110004, China; 2Department of Pediatric Surgery, Shegjing Affiliated Hospital, China Medical University Shenyang, Shenyang, 110004, China ;3Department of Biological Science, Shenyang Normal University Biochemics College, 110032, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hirschsprung disease glutathione S-transferase pi expression and regulation （ GSTPI ） methylation gene |
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