酒精促PC12细胞凋亡及对神经鞘磷脂合酶表达和活性的影响 |
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引用本文: | 冯爱芹,厉永强,王利枝,皇甫超申,石渊渊,邓锦波,刘彬.酒精促PC12细胞凋亡及对神经鞘磷脂合酶表达和活性的影响[J].国外医学:分子生物学分册,2010(6):476-482. |
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作者姓名: | 冯爱芹 厉永强 王利枝 皇甫超申 石渊渊 邓锦波 刘彬 |
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作者单位: | [1]河南大学护理学院神经生物学研究所,河南省开封市475004 [2]河南大学淮河临床学院检验科,河南省开封市475001 [3]河南大学医学院,河南省开封市475004 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.30771140) |
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摘 要: | 目的 观察酒精诱导PCI2细胞凋亡及其凋亡过程中神经鞘磷脂合酶活性和mRNA表达量的变化.方法 MTr法测定酒精对PCI2细胞增殖的抑制作用.Hoeelmt33258染色荧光显微镜观察PCI2细胞凋亡形态学变化.DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡梯状DNA条带.RT-PCR法检测酒精对PCI2细胞SMSI和SMS2 mRNA表达的影响.薄层层析法测定SMS的活性.结果 PCI2细胞去血清培养24 h,酒精浓度在100、200、400和800 mmoL/L时,细胞存活率分别是单纯去血清的87.54%、70.73%、57.89%和51.70%,表现出较强的细胞增殖抑制作用(P〈0.05);细胞核形态学变化显示酒精处理组凋亡细胞增多,表现染色质凝集,细胞核变小、核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,凋亡率随着酒精浓度的增大而升高,去血清组的酒精浓度为100、200和300 mmol/L时,细胞凋亡率呈剂量依赖关系;琼脂糖凝胶电泳可见酒精处理组有不同程度的DNA断裂,显示凋亡细胞典型的梯状DNA.RT-PCR检测酒精对PCI2细胞SMS转录水平结果显示,不同浓度酒精作用于PCI2细胞0.5 h,SMSI表达量无显著变化,当作用时间达1h和2 h,SMSl表达量显著增加,并呈剂量依赖性,而SMS2的mRNA表达则不受酒精作用的影响;薄层层析法检测细胞总SMS活性显示,不同浓度酒精作用2 h,细胞SMS活性随酒精浓度增加而升高.结论 酒精可导致PCI2细胞凋亡并与酒精浓度呈正相关.酒精致PCI2细胞凋亡过程中SMSl的mRNA表达量增高,酶活性增强,提示酒精致PCI2细胞凋亡作用与鞘磷脂循环有关.
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关 键 词: | 酒精 PC12细胞 凋亡 神经鞘磷脂合酶 |
Pro-apoptotic Effect of Ethanol on Expression and Activity of Sphingomyelin Synthase in PC12 Cells |
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Authors: | FENG Aiqin LI Yongqiang WANG Lizhi HUANGFU Chaoshen SHI Yuanyuan DENG Jinbo LIU Bin |
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Institution: | 1 Institute of Neurobiology, Nursing College of Henan University, Kaifeng, Henan, 475004, China 2 Department of clinical laboratory, Huai-he Clinical College of Henan University, Kaifeng, Henan, 475001, China 3 Henan University Medical College, Kaifeng, Henan, 475004, China) |
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Abstract: | |
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Keywords: | ethanol pheochromocytoma cell apoptosis sphingomyelin synthase |
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