APOBEC3F的克隆、真核表达及其抗HBV效应的初步研究

目的克隆、体外真核表达载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3F（APOBEC3F）基因并研究其抗病毒效应。方法应用RT—PCR的方法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3F基因，构建HA—APOBEC3F融合蛋白真核表达载体pXFA3F，pXFA3F和具有复制能力的1．3倍HBV载体pHBVl．3共转染HepG2细胞，Western印迹检测APOBEC3F融合蛋白在HepG2细胞中的表达，ELISA方法检测细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg水平，实时定量PCR检测HBV相关mRNA水平变化。结果克隆了APOBEC3F基因，其经测序与GeneBank公布序列一致；构建的APOBEC3F真核表达载体pXFA3F经转染可在HepG2细胞中瞬时表达；APOBEC3F可抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌，可使转染细胞内HBV相关mRNA水平下降。结论成功克隆并真核表达了APOBEC3F基因，其在体外具有抗HBV生物学效应。