大鼠SCN5A基因内含子1+204bp~+757bp转录调控功能分析 |
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引用本文: | 刘宇,李晖,董钦,张振明,李凤兰,李金波,马宁.大鼠SCN5A基因内含子1+204bp~+757bp转录调控功能分析[J].国外医学:分子生物学分册,2007,4(2):108-111. |
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作者姓名: | 刘宇 李晖 董钦 张振明 李凤兰 李金波 马宁 |
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作者单位: | 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,哈尔滨市150081 |
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摘 要: | 目的 克隆大鼠心肌SCN5A基因5’端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性。方法 扩增大鼠心肌SCN5A基因+204bp-+757bp、+204bp-+385bp和+204bp-+329bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因——pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性。结果 成功构建大鼠心肌SCN5A基因5’端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-PO、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍。结论SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329bp~+385bp为正调控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控。
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关 键 词: | SCN5A基因 转录调控 报告基因分析 顺式作用元件 |
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