| 苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L-苯丙氨酸 |
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| 引用本文： | 胡维,刘敬忠,向华,贾兴元,周艳.苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L-苯丙氨酸[J].微生物学杂志,2000(3). |
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| 作者姓名： | 胡维 刘敬忠 向华 贾兴元 周艳 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 利用基因重组技术 ,在大肠杆菌中克隆并表达苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) (EC4 .3 .1 .5) ,并应用此酶转化肉桂酸生成L 苯丙氨酸。方法是将欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG3 6e启动子P3 2下游 ,以菌落PCR法鉴定插入片段的大小和方向都正确的克隆 ,进而以HPLC检测肉桂酸浓度的方法鉴别重组质粒有催化肉桂酸生成L 苯丙氨酸的酶活力。结果获得能表达PAL酶活性的阳性克隆 ,在pH1 0 ,含 1 .0 %肉桂酸、8.0mol/L氨的转化液中 ,3 0℃反应 2 0h ,肉桂酸重量转化率可达 60 %。该基因工程菌有希望用于工业化生产L 苯丙氨酸。
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| 关 键 词： | 苯丙氨酸脱氨酶 苯丙氨酸 基因表达 |
CLONING AND EXPRESSION OF PHENYLALANINE AMMONIA LYASE (PAL) cDNA IN E.coli AND SYNTHESIS OF L-PHENYLALANINE ENZYMATICALLY |
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| Hu Wei et al..CLONING AND EXPRESSION OF PHENYLALANINE AMMONIA LYASE (PAL) cDNA IN E.coli AND SYNTHESIS OF L-PHENYLALANINE ENZYMATICALLY[J].Journal of Microbiology,2000(3). |
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| Authors: | Hu Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phenylalanine ammonia lyase (PAL) phenylalanine gene expression |
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