| 人源抗汉坦病毒核衣壳蛋白T7噬菌体抗体库的构建 |
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| 引用本文： | 刘兵,王美莲,王斯,史俊岩,郑兰艳,牟玲,罗恩杰.人源抗汉坦病毒核衣壳蛋白T7噬菌体抗体库的构建[J].微生物学杂志,2007,27(2):16-20. |
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| 作者姓名： | 刘兵 王美莲 王斯 史俊岩 郑兰艳 牟玲 罗恩杰 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学,基础医学院,病原生物教研室,辽宁,沈阳,110001
2. 沈阳市传染病院,肾综合征出血热研究所,辽宁,沈阳,110003 |
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| 摘 要： | 构建人源T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗汉坦病毒核衣壳蛋白(NP)抗体。从肾综合征出血热恢复期患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第一条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并将其与T7噬菌体载体的2个臂相连接。体外包装后,在宿主菌BLT5403中,扩增重组噬菌体抗体库。以基因工程表达NP进行4轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,酶免疫实验检测抗体活性。所建抗体库库容为1.35×107,扩增后初级库滴度为2.12×1010pfu/mL。以NP抗原筛选后抗体出现特异性富集,经酶免疫实验鉴定,得到2株与NP抗原特异结合的噬菌体抗体。结果表明,研究成功构建了人源抗NP蛋白T7噬菌体抗体库。
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| 关 键 词： | 汉坦病毒 T7噬菌体抗体库 |
| 文章编号： | 1005-7021(2007)02-0016-05 |
| 修稿时间： | 2007年1月22日 |
Construction of T7 Phage Display Library against Nucleocapsid Protein of Hantaan Virus |
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| LIU Bing,WANG Mei-lian,WANG Si,SHI Jun-yan,ZHENG Lan-yan,MU Ling,LUO En-jie.Construction of T7 Phage Display Library against Nucleocapsid Protein of Hantaan Virus[J].Journal of Microbiology,2007,27(2):16-20. |
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| Authors: | LIU Bing WANG Mei-lian WANG Si SHI Jun-yan ZHENG Lan-yan MU Ling LUO En-jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | scFv |
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