| HPV16L1VLP纯化、鉴定及血凝抑制实验方法的建立 |
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| 引用本文： | 邵迪,王燕,谷鸿喜,韩聪,李茉,商庆龙,李承刚.HPV16L1VLP纯化、鉴定及血凝抑制实验方法的建立[J].微生物学杂志,2007,27(2):29-32. |
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| 作者姓名： | 邵迪 王燕 谷鸿喜 韩聪 李茉 商庆龙 李承刚 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学,微生物学教研室,黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150086 |
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| 基金项目： | 黑龙江省科技攻关项目;黑龙江省哈尔滨市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 摘要通过昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达HPV16L1 VLP,纯化鉴定后利用其建立血凝抑制实验,检测HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。利用重组杆状病毒感染悬浮培养的昆虫细胞表达HPV16L1蛋白,大量获得VLP;优化扩增蛋白的条件并用SDS-PAGE分析鉴定;经氯化铯密度梯度离心法纯化VLP;利用所得VLP建立血凝抑制试验,鉴定制备的HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。优化蛋白表达条件结果显示,当重组杆状病毒感染细胞的MOI=10时目的蛋白表达量最大;按此滴度感染悬浮培养的昆虫细胞,收获、纯化VLP并鉴定其特异性;利用所得VLP建立了血凝抑制实验,鉴定HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制效价为1∶16。建立的血凝实验,可用于鉴定和检测HPV16L1相关抗体,为HPV诊断试剂的开发提供实验基础。
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒16型 悬浮培养 病毒样颗粒 HPV16L1单克隆抗体 血凝抑制 |
| 文章编号： | 1005-7021(2007)02-0029-04 |
| 修稿时间： | 2006年11月2日 |
HPV16L1 VLP Purification and Identification and the Establishment of Hemagglutination Inhibition Assay |
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| SHAO Di,WANG Yan,GU Hong-xi,HAN Cong,LI Mo,SHANG Qing-long,LI Cheng-gang.HPV16L1 VLP Purification and Identification and the Establishment of Hemagglutination Inhibition Assay[J].Journal of Microbiology,2007,27(2):29-32. |
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| Authors: | SHAO Di WANG Yan GU Hong-xi HAN Cong LI Mo SHANG Qing-long LI Cheng-gang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human papillomavirus (HPV) type 16 suspension culture virus-like particle hemagglutination inhibition |
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