| p LA-PEDV-S1质粒拷贝数与发酵重组乳酸菌S1表达量之间的相关性研究 |
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| 引用本文： | 窦速林,刘卫贞,侯喜林,张冰冰,王桂华,余丽芸.p LA-PEDV-S1质粒拷贝数与发酵重组乳酸菌S1表达量之间的相关性研究[J].微生物学杂志,2018(5):27-33. |
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| 作者姓名： | 窦速林 刘卫贞 侯喜林 张冰冰 王桂华 余丽芸 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319,黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319,黑龙江八一农垦大学 动物科技学院，黑龙江 大庆 163319,黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319,黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319,黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319;黑龙江八一农垦大学 动物科技学院，黑龙江 大庆 163319 |
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| 基金项目： | 黑龙江省垦区科研课题（HNK135-04-06-04） |
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| 摘 要： | 探究质粒拷贝数以及目标蛋白S1表达量与发酵时间的关系,从而确定放大生产p LA-PEDV-S1/Lactobacillus casei的最佳发酵时间。通过发酵重组干酪乳杆菌,绘制重组干酪乳杆菌的生长曲线,确定其生长的最佳时期。将p LA-PEDV-S1/L. casei分别接种至添加抗生素和不添加抗生素的MRS培养基中传代培养,进行稳定性实验。使用荧光定量PCR方法检测重组干酪乳杆菌中质粒的拷贝数,使用流式细胞术检测乳酸菌表达的目标蛋白。重组菌在7 h达到生长顶点,传至120代时外源质粒并无丢失情况出现。质粒拷贝数在9 h达到峰值29. 34,表达目标蛋白的重组菌在7 h达到峰值97. 98%。结果显示在细菌生长的对数生长期末期,质粒拷贝数最高且S1表达量最多;在平台期随着发酵时间的增加,质粒拷贝数逐渐降低,S1表达量也相应减少。发酵的最佳时间为7～10 h,质粒拷贝数与S1表达量之间存在着正相关性。
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| 关 键 词： | 重组干酪乳杆菌 荧光定量PCR 质粒拷贝数 S1蛋白的表达量 |
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