| 重组猪源胰蛋白酶原的构建、表达与活性分析 |
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| 引用本文： | 冯雪婷,刘素丽,黄潇,王云康,龙军,金亮,曹荣月.重组猪源胰蛋白酶原的构建、表达与活性分析[J].微生物学杂志,2014,38(12). |
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| 作者姓名： | 冯雪婷 刘素丽 黄潇 王云康 龙军 金亮 曹荣月 |
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| 作者单位： | 中国药科大学生命科学与技术学院，江苏 南京210009；江苏未名生物医药有限公司，江苏 常州 213000 ；,江苏未名生物医药有限公司，江苏 常州 213000,江苏未名生物医药有限公司，江苏 常州 213000,中国药科大学生命科学与技术学院，江苏 南京210009,南京中医药大学生命科学与技术学院，江苏 南京 210046,中国药科大学生命科学与技术学院，江苏 南京210009,中国药科大学生命科学与技术学院，江苏 南京210009 |
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| 基金项目： | 国家级大学生创新创业训练计划项目（No.J1030830)；国家自然科学基金（No.81172973；No.81373232） |
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| 摘 要： | 目的：构建、表达重组猪源胰蛋白酶原，并对其进行分离纯化和酶活性分析。方法：利用大肠埃希菌表达系统（pET-28a，宿主菌BL21 DE3）优化天然猪源胰蛋白酶原基因，经乳糖诱导表达重组胰蛋白酶原蛋白，采用阴离子交换色谱法分离纯化，以SDS-PAGE 电泳鉴定目标蛋白，以紫外分光光度法检测重组蛋白的酶活力。结果：测序结果表明，重组猪源胰蛋白酶原基因工程菌构建成功，SDS-PAGE检测显示目的蛋白条带位置与标准猪源胰蛋白酶条带位置一致，且酶活力可达513.09 U?mg-1。结论：成功获得了重组猪源胰蛋白酶原，且酶活力较好，为进一步研究生产提供了基础。
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| 关 键 词： | 猪源胰蛋白酶原基因 包涵体变性 乳糖诱导 稀释复性 |
Cloning and Expression of Porcine-recombination Trypsinogen Gene and Its Activity Analysis |
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| FENG Xueting,LIU Suli,HUANG Xiao,WANG Yunkang,LONG Jun,JIN Liang and CAO Rongyue.Cloning and Expression of Porcine-recombination Trypsinogen Gene and Its Activity Analysis[J].Journal of Microbiology,2014,38(12). |
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| Authors: | FENG Xueting LIU Suli HUANG Xiao WANG Yunkang LONG Jun JIN Liang and CAO Rongyue |
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| Institution: | School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China;Js Bioway Pharmaceutical Co.,LTD,Changzhou 213000, China;,Js Bioway Pharmaceutical Co.,LTD,Changzhou 213000, China,Js Bioway Pharmaceutical Co.,LTD,Changzhou 213000, China,School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China,School of Life Science and Technolog, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210046, China,School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China and School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant trypsin denaturing of inclusion body induction of lactose dilution method |
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