| 香菇C_(91-3)转录本Unigene14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 杜忠娟,钟民涛,伦永志,刘奔,张伟,王晓丽,李星云,曹靖,宁安红,黄敏.香菇C_(91-3)转录本Unigene14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析[J].微生物学杂志,2014(1):22-27. |
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| 作者姓名： | 杜忠娟 钟民涛 伦永志 刘奔 张伟 王晓丽 李星云 曹靖 宁安红 黄敏 |
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| 作者单位： | 大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连大学 医学院， 辽宁 大连 116622;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044;大连医科大学 微生物教研室， 辽宁 大连 116044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30770018) |
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| 摘 要： | 旨在克隆香菇C91-3转录本Unigene 14872基因中的Pkinase结构域,并对其进行生物信息学分析。提取香菇C91-3菌丝体中总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得Unigene 14872基因全长。用NCBI对其进行生物信息学分析,预测其具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Pkinase)结构域。设计引物PCR扩增Pkinase结构域,然后克隆至pET32a(+)载体,再热转化至JM109中保存并进行质粒测序。重组质粒pET32a(+)-Pkinase构建成功,并成功诱导表达重组蛋白,初步鉴定该蛋白具有抗肿瘤活性,为进一步研究重组蛋白的活性及作用机制奠定基础。
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| 关 键 词： | 香菇C91-3 克隆 生物信息学 蛋白激酶 |
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