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响应面法优化赤红球菌HDRR2Y发酵培养参数
引用本文:张淞,胡晓娟,徐煜,徐创文,杨铿,苏浩昌,徐武杰,文国樑,张建设,曹煜成.响应面法优化赤红球菌HDRR2Y发酵培养参数[J].微生物学杂志,2022(5):50-57.
作者姓名:张淞  胡晓娟  徐煜  徐创文  杨铿  苏浩昌  徐武杰  文国樑  张建设  曹煜成
作者单位:1.浙江海洋大学 国家海洋设施养殖工程技术研究中心,浙江 舟山 316022;2.中国水产科学研究院 南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室/广东省渔业生态环境重点实验室,广东 广州 510300;2.中国水产科学研究院 南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室/广东省渔业生态环境重点实验室,广东 广州 510300;3.岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心,广东 茂名 525000;1.浙江海洋大学 国家海洋设施养殖工程技术研究中心,浙江 舟山 316022;2.中国水产科学研究院 南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室/广东省渔业生态环境重点实验室,广东 广州 510300;3.岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心,广东 茂名 525000
基金项目:国家重点研发计划项目(2020YFD0900401);财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系项目(CARS-48);中国水产科学研究院基本科研业务费专项(2020TD54);中国水产科学研究院南海水产研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2021SD08);广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项(2019KJ149)
摘    要:通过响应面法对硝化菌——赤红球菌(Rhodococcus ruber)HDRR2Y的发酵培养参数进行优化,以提高其活菌数。首先通过单因素实验筛选出赤红球菌HDRR2Y的最优碳、氮源,并采用Plackett-Burman实验得到影响活菌数的显著因素,然后进行响应面实验,经最陡爬坡及回归分析得出最佳培养参数,最后以摇瓶实验检验其合理性。结果显示,赤红球菌HDRR2Y的最优碳、氮源分别为乙酸钠和酵母膏+蛋白胨+氯化铵(1:1:1,质量比),显著影响活菌数的因素有碳、氮源及温度,经回归分析得到的最优培养参数为乙酸钠5.48 g/L、酵母膏+蛋白胨+氯化铵4.96 g/L、温度29.24 ℃、pH 7.0、转速200 r/min、MgSO4 0.2 g/L, KH2PO4 0.5 g/L, NaCl 9 g/L, CaCl2 0.5 g/L, MnSO4 0.025 g/L, FeSO4 0.05 g/L, C5H9NO4 0.002 g/L、接种活菌数1×104 cfu/mL、装液量40%(体积分数)、培养时间36 h。优化后的实际活菌数为1.54×109 cfu/mL,远高于优化前的活菌数(1.8×108 cfu/mL)(P<0.01)。因此,采用响应面法优化赤红球菌HDRR2Y的发酵培养参数能大幅提高其发酵活菌数,为硝化菌剂的工业化生产提供数据参考。

关 键 词:赤红球菌  硝化菌  培养参数  Box-Behnken设计  响应面分析

Optimization of Ferment Cultivation Parameters of Rhodococcus ruber HDRR2Y by Response Surface Method
ZHANG Song,HU Xiao-juan,XU Yu,XU Chuang-wen,YANG Keng,SU Hao-chang,XU Wu-jie,WEN Guo-liang,ZHANG Jian-she,CAO Yu-cheng.Optimization of Ferment Cultivation Parameters of Rhodococcus ruber HDRR2Y by Response Surface Method[J].Journal of Microbiology,2022(5):50-57.
Authors:ZHANG Song  HU Xiao-juan  XU Yu  XU Chuang-wen  YANG Keng  SU Hao-chang  XU Wu-jie  WEN Guo-liang  ZHANG Jian-she  CAO Yu-cheng
Abstract:
Keywords:Rhodococcus ruber  nitrifying bacteria  culture parameter  Box-Behnken design  response surface method
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