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褐藻胶裂解酶在枯草芽胞杆菌中的重组表达及催化特性研究
引用本文:李星霖,吴雯,徐翊文,李恒,龚劲松,徐国强,史劲松,许正宏.褐藻胶裂解酶在枯草芽胞杆菌中的重组表达及催化特性研究[J].微生物学杂志,2021(6):18-26.
作者姓名:李星霖  吴雯  徐翊文  李恒  龚劲松  徐国强  史劲松  许正宏
作者单位:江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122;江南大学 生命科学与健康工程学院,江苏 无锡 214122; 江南大学 糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122; 江南大学 粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏 无锡 214122
基金项目:江苏省重点研发项目(BE2018622);江苏省现代农业面上项目(BE2019349);扬州市现代农业项目(YZ2019029)
摘    要:为拓展褐藻胶裂解酶在高效、安全的枯草芽胞杆菌体系中的表达,成功构建一株海洋来源的贝特氏菌(Cobetia sp.)WG-007褐藻胶裂解酶枯草芽胞杆菌工程菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-aly-cob,对主要发酵条件进行优化,并对重组酶Aly-Cob的酶学性质进行表征。结果表明,优化后的工程菌培养温度和初始pH分别为30 ℃和7.0,发酵培养基为添加15 g/L甘油和30 g/L酵母浸膏的TB培养基。在此条件下,摇瓶发酵48 h褐藻胶裂解酶Aly-Cob酶活为58.62 U/mL,是优化前的2.7倍。重组酶Aly-Cob最适反应温度和pH分别为40 ℃和7.0,Mg2+、Ca2+、Na+和K+对酶活有促进作用,该酶可特异性地降解褐藻胶及其片段。研究拓展了褐藻胶裂解酶基因在枯草芽胞杆菌中的表达,为褐藻胶裂解酶的应用提供补充和参考。

关 键 词:褐藻胶裂解酶  重组表达  枯草芽胞杆菌  发酵优化  酶学性质  海洋微生物

Recombinant Expression of Alginate Lyase in Bacillus subtilis and Catalytic Properties Characterization
LI Xing-lin,WU Wen,XU Yi-wen,LI Heng,GONG Jin-song,XU Guo-qiang,SHI Jin-song,XU Zheng-hong.Recombinant Expression of Alginate Lyase in Bacillus subtilis and Catalytic Properties Characterization[J].Journal of Microbiology,2021(6):18-26.
Authors:LI Xing-lin  WU Wen  XU Yi-wen  LI Heng  GONG Jin-song  XU Guo-qiang  SHI Jin-song  XU Zheng-hong
Abstract:
Keywords:alginate lyase  recombinant expression  Bacillus subtilis  fermentation optimization  enzymatic properties  marine microorganism
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