| 茄科劳尔氏菌单克隆抗体的制备及其特性鉴定 |
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| 引用本文： | 马兰,曾海娟,谢曼曼,胡谦,丁承超,王淑娟,翟绪昭,孙静娟,李杰,王艳,董庆利,刘箐.茄科劳尔氏菌单克隆抗体的制备及其特性鉴定[J].微生物学杂志,2019(1):95-100. |
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| 作者姓名： | 马兰 曾海娟 谢曼曼 胡谦 丁承超 王淑娟 翟绪昭 孙静娟 李杰 王艳 董庆利 刘箐 |
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| 作者单位： | 上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093,上海理工大学 医疗器械与食品学院， 上海 200093 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31371776）；“乳制品生产体系致病菌快速检测”合作项目（3A15308006） |
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| 摘 要： | 茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum,RS)是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜青枯病害的致病菌。为实现对RS的快速高效检测,以茄科劳尔氏菌株1.76免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后利用间接酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)筛选出3株能稳定分泌抗茄科劳尔氏菌株1.76的单克隆杂交瘤细胞株1C1、1B3和9D7。然后利用小鼠体内诱生腹水,1C1、1B3和9D7效价分别为1:1 024 000、1:64 000、1:256 000。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,经SDS-PAGE鉴定显示纯化后的单克隆抗体(Monoclonal Antibodies,mAb)纯度较高。纯化后单克隆抗体(2 mg/mL)效价分别为1:17 529、1:35 819、1:50 000,抗体亚型均为IgG1。对3株抗体进行特异性检测结果显示,1C1和9D7均不能与RS-5结合,1B3不能结合1.74和RS-5。此外,检测结果还表明3株单克隆抗体与桑肠杆菌JX-6、苏云金芽胞杆菌SYJ及实验室现有11株燕麦嗜酸菌卡特莱兰亚种、燕麦嗜酸菌西瓜亚种、玉米细菌性条斑菌、嗜酸菌魔芋亚种,梨火疫病菌QB0809、 XL-4,玉米细菌性枯萎病菌QB0241、QB0242,水稻细菌性谷枯病菌QB0017、QB0753、QB0755均无交叉情况。此次茄科劳尔氏菌抗体的制备,为后期青枯病菌的快速检测提供参考。
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| 关 键 词： | 茄科劳尔氏菌 ELISA 单克隆抗体 |
Monoclonal Antibodies against Ralstonia solanacearum |
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| MA Lan,ZENG Hai-juan,XIE Man-man,HU Qian,DING Cheng-chao,WANG Shu-juan,ZHAI Xu-zhao,SUN Jing-juan,LI Jie,WANG Yan,DONG Qing-li and LIU Qing.Monoclonal Antibodies against Ralstonia solanacearum[J].Journal of Microbiology,2019(1):95-100. |
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| Authors: | MA Lan ZENG Hai-juan XIE Man-man HU Qian DING Cheng-chao WANG Shu-juan ZHAI Xu-zhao SUN Jing-juan LI Jie WANG Yan DONG Qing-li and LIU Qing |
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| Institution: | Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093,Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093 and Schl. of Med. Inst. & Food Engin., Uni. of Shanghai for Sci. & Tech., Shanghai 200093 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ralstonia solanacearum monoclonal antibodies (mAbs) ELISA |
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