分子无性繁殖载体的组建——Ⅰ.乳糖操纵子的重组和表达 |
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引用本文: | 敖世洲,高美华.分子无性繁殖载体的组建——Ⅰ.乳糖操纵子的重组和表达[J].生物化学与生物物理学报,1982(2). |
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作者姓名: | 敖世洲 高美华 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物化学研究所
(敖世洲),中国科学院上海生物化学研究所(高美华) |
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摘 要: | 用包含乳糖操纵子的λplac 5 EcoR1 DNA 片段与质粒pBR 322重组,获得一个重组质粒pMG4。几种限制性内切酶的分析结果表明,pMG4上乳糖操纵子(lac)和抗氨基苄青霉素基因的转录方向一致;Iac 插入片段λ区的Hind Ⅲ切点和pBR 322抗四环素基因上的Hind Ⅲ切点相邻近。用pMG4 Hind Ⅲ片段转化大肠杆菌C_(600),筛选Ap~r Tc~s lac~ 转化体,得到另一个lac 重组质粒pMG401,在β-半乳糖苷酶结构基因近羧基端有一个EcoR1切点,插入外源基因可以置于lac 控制下而实现表达。同时,我们还测定了包含pMG4、pMG401或λplac 5不同细胞的β-半乳糖苷酶活力,对lac 的表达作了分析。
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