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抗癌胚抗原嵌合重链与核心链霉亲和素基因的融合及表达
引用本文:杨卫东,李彪,朱承谟,廖文韬,杨冠珍,吴祥甫.抗癌胚抗原嵌合重链与核心链霉亲和素基因的融合及表达[J].生物化学与生物物理学报,2000(1).
作者姓名:杨卫东  李彪  朱承谟  廖文韬  杨冠珍  吴祥甫
基金项目:国家自然科学基金,上海市启明星计划资助
摘    要:将抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体的重链可变区与人的恒定区(Cγ3) 连接, 制备抗癌胚抗原嵌合重链用于放免治疗及其他导向治疗, 可减少人抗鼠抗体反应(HAMA) 。为纯化及核素标记抗体, 将嵌合重链基因与核心链霉亲和素基因融合。融合基因在大肠杆菌得到高效表达, 表达量占菌体总蛋白的24 % 。SDSPAGE 和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为70 kD, 与其基因编码蛋白质的理论推算值相符。以HRP标记的生物素作为抗体进行蛋白质印迹, 在70 kD 处可见表达条带, 表明融合蛋白能特异性地与生物素结合, 使嵌合重链经生物素柱进行廉价纯化成为可能。表达产物在胞内主要以不溶性的包含体存在, 经变性和复性处理后, RIA 表明表达产物具有结合其特异性抗原CEA的能力。

关 键 词:癌胚抗原  嵌合重链  链霉亲和素  基因表达

Fusion and Expression of the Genes Encoding Murine Human Chimeric Heavy Chain to Carcinoembryonic Antigen with Core streptavidin Gene
YANG Wei Dong ,LI Biao ,ZHU Cheng Mo ,LIAO Wen Tao ,YANG Guan Zhen ,WU Xiang Fu.Fusion and Expression of the Genes Encoding Murine Human Chimeric Heavy Chain to Carcinoembryonic Antigen with Core streptavidin Gene[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,2000(1).
Authors:YANG Wei Dong    LI Biao  ZHU Cheng Mo  LIAO Wen Tao  YANG Guan Zhen  WU Xiang Fu
Institution:YANG Wei Dong 1,2,LI Biao 1,ZHU Cheng Mo 1,LIAO Wen Tao 2,YANG Guan Zhen 2,WU Xiang Fu 2
Abstract:
Keywords:carcinoembryonic antigen  chimeric heavy chain antibody  core  streptavidin  geng expression  
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