人胸腺肽β4基因的克隆表达及活性检测 |
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引用本文: | 陈妍柯,杨辉,等.人胸腺肽β4基因的克隆表达及活性检测[J].生物化学与生物物理学报,2002,34(4):502-505. |
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作者姓名: | 陈妍柯 杨辉 |
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作者单位: | 兰州大学生命科学学院,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,兰州大学生命科学学院,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 兰州730000,西安710032,西安710032,西安710032,兰州7 |
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摘 要: | 采用化学与酶促合成技术 ,将胸腺肽 β4基因拆分为两个末端互补的片段进行化学合成 ,经变性、退火以及T4DNA聚合酶延伸过程 ,获得完整编码的基因片段。通过一平一粘末端连接 ,将胸腺肽 β4基因片段克隆入pLDH4 (一种大肠杆菌温度诱导表达载体 )的EcoRV和HindIII位点之间。经克隆筛选和DNA序列测定 ,获得目的基因表达工程菌 ,且表达量占细菌总蛋白质的 30 %。利用盐析和多种层析技术联合纯化该表达多肽 ,纯度达95 % ;活性测定表明纯化的人胸腺肽 β4能够促进淋巴细胞的增殖和分化
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关 键 词: | 人胸腺肽β4 基因表达 E玫瑰花结 MTT |
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