组蛋白-亲和层析分离猪心cAMP激活的蛋白激酶

本文报导用亲和层析分离猪心蛋白激酶的结果,以及对这个酶的性质的初步观察。亲和吸附剂的配基为全组蛋白,它与琼脂糖4B或直接相联;或分别通过丙氨酸、甘氨酰甘氨酸、亮氨酰甘氨酰甘氨酸三种不同长度“手臂”的活化酯,在温和的条件下相联。上述四种亲和吸附剂的分离效果以双甘肽为“手臂”的最好。猪心粗抽液经亲和层析一步分离得到的蛋白激酶,其比活提高五十倍左右,活力回收达百分之五十。初步测定了这个酶的分子量、等电点、对ATP的K_m和cAMP的结合常数,观察到它对cAMP可能有两种结合部位。活力保存实验表明,酶在甘油中4℃保存四个月活力不变,cAMP激活性质也不变。