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K253R和N184V点突变对葡萄糖异构酶热稳定性的影响
引用本文:伍传金,肖亚中.K253R和N184V点突变对葡萄糖异构酶热稳定性的影响[J].生物化学与生物物理学报,1996,28(3):272-278.
作者姓名:伍传金  肖亚中
作者单位:中国科学技术大学生物系,安徽大学生物系
基金项目:国家“863”计划资助
摘    要:用人工合成的寡核苷酸突变引物,以双引物法于重组M13mp19载体上进行定点突变,分别得到了葡萄糖异构酶的突变体GIK253R和GIN184V。测定它们的热稳定性,并将之与野生型酶比较,结果表明:(1)GIK253R于70℃、80℃下的热稳定性小于野生型,但在70℃、1mol/LL-鼠李糖中,两者的失活速度相近。另外;GIK253R的比活是野生型的1.5倍。(2)GIN184V的比活和热稳定性都远低于野生型,Asn184为酶活性中心构象的维持所必需.本文还根据动力学数据和分子结构模型对以上结果作了初步分析.

关 键 词:葡萄糖异构酶  定点诱变  蛋白质工程  热稳定性

Effects of Site-specific Mutagenesis of K253 and N184V on the Thermostability of D-Glucose Isomerase
WU Chuan-Jin,XIAO Ya-Zhong,LONG Fan,TENG Mai-Kun,WANG Chun and CUI Tao.Effects of Site-specific Mutagenesis of K253 and N184V on the Thermostability of D-Glucose Isomerase[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,1996,28(3):272-278.
Authors:WU Chuan-Jin  XIAO Ya-Zhong  LONG Fan  TENG Mai-Kun  WANG Chun and CUI Tao
Abstract:
Keywords:D-glucose isomerase  Site-specific mutagenesis  Protein engineering  Thermostability
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