| 牛生长激素基因的人工合成,重组克隆及高效表达 |
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| 引用本文： | 李伯良,梁镇和.牛生长激素基因的人工合成,重组克隆及高效表达[J].生物化学与生物物理学报,1994,26(5):505-512. |
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| 作者姓名： | 李伯良 梁镇和 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海生物化学研究所 |
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| 摘 要： | 本文通过设计选择大肠杆菌高频利用密码子代替天然密码子，人工全合成３２个寡聚核苷酸片段；连接并克隆获得Ａ（２７８ｂｐ）、Ｂ（８８ｂｐ）、Ｃ（２２４ｂｐ）３个较大ＤＮＡ片段；经重组克隆、定位突变等获得阳性克隆；双向ＤＮＡ序列测定分析表明获得了两种人工全合成牛生长激素（ｂＧＨ）编码基因，即编码Ｎ－Ｍｅｔ－Ａｌａ－ｂＧＨ和Ｎ－Ｍｅｔ－Ｐｈｅ－ｂＧＨ的两个基因，而至今尚未见有人工全合成ｂＧＨ基因的报道。构建了在ＰＬｐｒｏｍｏｔｅｒ控制下含上述合成基因的表达质位ｐＢＬｂＧＨＥ７Ａ１和ｐＢＬｂＧＨＥ８，并在大肠杆菌中进行了温敏诱导表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，表达产物占全菌蛋白的３７％以上。Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析和纯化产物的Ｎ端氨基酸序列测定结果都表明上述两种人工全合成ｂＧＨ基因在大肠杆菌中得到了高效表达，表达量为现今国际文献报道的高限水平。
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| 关 键 词： | 牛生长激素基因 DNA 人工合成 基因表达 重组 |
Synthesis, Cloning and High-level Expression of the Bovine Growth Hormone Cenes |
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| LI Bo-LIANG, LIANG Zhen-He, YANG Xin-Ying, GAN Ke-Da,ZHOU Bing, FI Qi-Liang and TANG Jin-Yan.Synthesis, Cloning and High-level Expression of the Bovine Growth Hormone Cenes[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,1994,26(5):505-512. |
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| Authors: | LI Bo-LIANG LIANG Zhen-He YANG Xin-Ying GAN Ke-Da ZHOU Bing FI Qi-Liang and TANG Jin-Yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bGH gene DNA synthesis Gene expression |
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