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多发性骨髓瘤细胞株ARH—77恶性相关基因hMMTAG2的克隆和序列分析
引用本文:田菁燕,胡维新,等.多发性骨髓瘤细胞株ARH—77恶性相关基因hMMTAG2的克隆和序列分析[J].生物化学与生物物理学报,2003,35(2):143-148.
作者姓名:田菁燕  胡维新
作者单位:中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,University of Arkansas for Medical Sciences,中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心 长沙410078,长沙410078,Arkansas Cancer Research Center,Little Rock,AR 72205,USA,长沙410078,长沙410078,长沙410078,长沙410078
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (No.39880 0 2 1),国家教育部重点实验室访问学者基金资助项目~~
摘    要:为从人类多发性骨髓瘤细胞株中克隆新的恶性相关基因 ,构建人类多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库。从ARH 77细胞中提取mRNA并逆转录合成双链cDNA ,经PCR扩增后 ,插入表达载体 ,得到ARH 77细胞cDNA表达文库。将文库菌落印迹至尼龙膜 ,分区培养提取质粒DNA ,建立基因池 ,并分别转染NIH/ 3T3细胞。经G418筛选并计集落数 ,选择克隆数最多的基因池进入第二轮。如此反复进行。通过测序 ,排除所有已知的癌基因、抑瘤基因、细胞因子及其受体 ,获得了有转化活性的cDNA克隆A6 2 17。进一步使用RACE技术对 5′端进行快速扩增 ,获得全长为 130 0bp的cDNA序列 ,该基因由 8个外显子组成 ,编码产物为 2 6 3个氨基酸组成的多肽链。将该基因暂时命名为多发性骨髓瘤转化基因 2 (tumor associatedgene 2fromhumanmultiplemyeloma ,hMMTAG2 )。该基因定位于人类染色体 1q42 .13。生物信息学分析发现 ,hMMTAG2编码有多个蛋白激酶的磷酸化位点、N 肉豆蔻酸化位点及核定位信号 ,提示该基因的表达产物可能是细胞核内的一种信号分子。

关 键 词:多发性骨髓瘤  ARH-77细胞株  基因克隆  多发性骨髓瘤转化基因2(hMMTAG2)

Cloning and Sequence Analysis of Tumor-associated Gene hMMTAG2 from Human Multiple Myeloma Cell Line ARH-77
TIAN Jing-Yan,HU Wei-Xin ,TIAN Er-Ming,SHI Yi-Wu,SHEN Qun-Xi,TANG Li-Jun,JIANG Yuan-Shan.Cloning and Sequence Analysis of Tumor-associated Gene hMMTAG2 from Human Multiple Myeloma Cell Line ARH-77[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,2003,35(2):143-148.
Authors:TIAN Jing-Yan  HU Wei-Xin  TIAN Er-Ming  SHI Yi-Wu  SHEN Qun-Xi  TANG Li-Jun  JIANG Yuan-Shan
Institution:TIAN Jing-Yan,HU Wei-Xin *,TIAN Er-Ming1,SHI Yi-Wu,SHEN Qun-Xi,TANG Li-Jun,JIANG Yuan-Shan
Abstract:
Keywords:human multiple myeloma  ARH-77 cell line  gene cloning  human multiple myeloma transforming genes (hMMTAG2)
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