绿豆胰蛋白酶抑制剂┐猪胰蛋白酶复合物的四方晶体结构

本文报道了绿豆胰蛋白酶抑制剂－猪胰蛋白酶（１∶２）复合物的四方晶体的结构测定。晶体属于Ｉ４２２空间群，衍射分辨率为０．２５ｎｍ，共确定了绿豆抑制剂５６个残基的空间位置。与已报道的三方晶体结构相比，其中的抑制剂分子的结构基本相同，并且抑制剂－酶三元复合物在四方晶体中也处于堆积无序状态，即复合物按两种取向进行堆积：Ｔａ∶ＭａＭｂ∶Ｔｂ和Ｔｂ∶ＭｂＭａ∶Ｔａ（Ｔａ，Ｔｂ为胰蛋白酶，Ｍａ为抑制剂结合环Ⅰ，Ｍｂ为抑制剂结合环Ⅱ）。但四方晶体结构比三方晶体结构多测定了一个抑制剂残基Ｐｒｏ１１的位置，同时，四方晶体中的抑制剂不存在膺β－折叠片层结构，其构象与三方晶体中的抑制剂相比有所变化。分析表明抑制剂的两个刚性的结构域之间的连接肽具有一定的柔性，并因此形成不同的晶型。此外，绿豆抑制剂与其他Ｂｏｗｍａｎ－Ｂｉｒｋ抑制剂相比，分子的两个双股的反平行β－折叠片层和抑制活性位点所在的结合环的结构具有很高的保守性