| 组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体工程细胞株生物学特性分析 |
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| 引用本文： | 陈琳,徐秀英,刘士辉,朱恒奇,黄培堂,黄翠芬.组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体工程细胞株生物学特性分析[J].分子细胞生物学报,1998(2). |
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| 作者姓名： | 陈琳 徐秀英 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 黄翠芬 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071，北京 100071，北京 100071，北京 100071，北京 100071，北京 100071 |
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| 摘 要： | t-PA突变体工程细胞株FSGGI48形态与其亲代细胞CHO-dhfr相似呈多角形,类似上皮细胞。在MTX加压至5×10~(-6)mol/L时,少数细胞形态略变瘦长,但仍呈多角形,因此该工程细胞株形态正常。抗体中和抑制试验及纤维蛋白板80℃加热试验显示,FSGGI48细胞表达产物与st-PA的活性均能被抗t-PA抗体所抑制,而胰酶的活性则不被抑制,且二者在80℃加热的纤维蛋白板上均不产生溶解圈,胰酶则产生溶解圈,由此可知,该细胞株表达产物为特异的rt-PA产品。细胞无血清培养上清经FA-PA检测,亚克隆株表达水平为4000IU/10~6细胞/24h。分别测定冻存3个月后复苏和体外传代3个月以上细胞的表达水平,结果显示部分亚克隆细胞株表达水平下降,多数仍为3000-4000IU/10~6细胞/24h,说明细胞株稳定性好。裸鼠试验表明,该工程株活细胞、细胞DNA、纯化的细胞表达产物均无致瘤性。支原体检查结果为阴性。染色体分析显示,FSGGI48细胞与其亲代细胞(CHO-dhfr细胞)染色体数目相同均为20条,但均有不同程度不同类型的畸变。CHO-dhfr细胞畸变率为6%。该工程细胞的畸变率为15%-18%,在允许范围内。结果证明,t-PA突变体细胞株FSGGI48为性能优良的工程细胞株。
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| 关 键 词： | t-PA突变体 工程细胞株 |
THE ANALYSIS OF BIOLOGICAL CHARACTERISTICS FOR THE TISSUE-PLASMINOGEN ACTIVATOR (t-PA) MUTANT ENGINEERED CELL LINE |
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| CHEN Lin XU Xiu Ying LIU Shi Hui ZHU Heng Qi HUANG Pei Tang HUANG Cui Fen.THE ANALYSIS OF BIOLOGICAL CHARACTERISTICS FOR THE TISSUE-PLASMINOGEN ACTIVATOR (t-PA) MUTANT ENGINEERED CELL LINE[J].Journal of Molecular Cell Biology,1998(2). |
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| Authors: | CHEN Lin XU Xiu Ying LIU Shi Hui ZHU Heng Qi HUANG Pei Tang HUANG Cui Fen |
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| Keywords: | t-PA mutant Engineered cell line |
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