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多表位hCG嵌合肽(CP1和CP10)抗原的构建及其免疫原性
引用本文:徐万祥,何亚萍,邱德义,廖矛川,洪爱真,季朝能,顾少华,陈金中,谢毅.多表位hCG嵌合肽(CP1和CP10)抗原的构建及其免疫原性[J].分子细胞生物学报,2006,39(5):414-422.
作者姓名:徐万祥  何亚萍  邱德义  廖矛川  洪爱真  季朝能  顾少华  陈金中  谢毅
作者单位:上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室,上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室,上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室,上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室,上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室,复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室 上海 200032 上海科学院新药创制中心,上海 200235,上海 200032,上海 200032,上海 200032,上海 200032,上海 200433,上海 200433,上海 200433,上海 200433
基金项目:国家自然科学基金(No.39870856和No.30070792)资助。~~
摘    要:本研究设计了CP1和CP10两种嵌合肽免疫原,它们由人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β- hCG)3个线性B细胞表位(BCE)以及包括来自乙肝表面抗原和破伤风类毒素2个广谱性T细胞表位(TCE)的6个TCEs组合而成。编码CP1及其衍生物CP10的人工基因分别重组插入热诱导pBV221载体后,均能在大肠杆菌中以约占细菌总蛋白1%的比例被表达。在蛋白印迹试验中,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上显示约为16.5 kD分子量的CP1和CP10表达蛋白,能被抗各插入表位单克隆或多克隆抗体识别。各表达蛋白可用制备性PAGE方法一步纯化,纯化产物均显示95%以上的电泳均一性,纯化得率可达到每升培养液1-2mg水平。以它们为抗原主动免疫小鼠,都能分别产生识别CP1或CP10和天然β-hCG的抗血清,并都能在它们的抗血清中检测到各插入抗原表位的抗体。hCG CPs的可获得性及其能诱导各表位抗体生成特征,有可能成为研制hCG抗生育和肿瘤治疗性疫苗的新的候选免疫原。

关 键 词:人毛膜促性腺激素β亚单位  嵌合肽免疫原  原核表达  纯化  免疫应答
收稿时间:2006-01-18
修稿时间:2006-06-30

CONSTRUCTION AND IMMUNOGENICITY OF hCG CHIMERIC PEPTIDES (CP1 and CP10) CONTAINING THREE SELF- B CELL EPITOPES AND SIX FOREIGN T CELL EPITOPES
XU Wan Xiang,HE Ya Ping,QIU De Yi,LIAO Mao Chuan,HONG Ai Zhen,JI Zhao Neng,GU Shao Hua,CHEN Jin Zhong,XIE Yi.CONSTRUCTION AND IMMUNOGENICITY OF hCG CHIMERIC PEPTIDES (CP1 and CP10) CONTAINING THREE SELF- B CELL EPITOPES AND SIX FOREIGN T CELL EPITOPES[J].Journal of Molecular Cell Biology,2006,39(5):414-422.
Authors:XU Wan Xiang  HE Ya Ping  QIU De Yi  LIAO Mao Chuan  HONG Ai Zhen  JI Zhao Neng  GU Shao Hua  CHEN Jin Zhong  XIE Yi
Institution:1Department of Reproductive Biology,Shanghai Institute of Planned Parenthood Research, Shanghai 200032;2Center for Drug Development,Shanghai Academy of Science, Shanghai 200235; 3StateKey Laboratory of Genetic Engineering, Institute of Genetics, School of Life Science,Fudan University, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:
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