| AiiA蛋白的可溶性表达及其抗菌活性研究 |
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| 引用本文： | 杨梅,张锋,林彬辉,苏新华,郭丽清,黄志鹏,关雄.AiiA蛋白的可溶性表达及其抗菌活性研究[J].分子细胞生物学报,2008,41(6). |
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| 作者姓名： | 杨梅 张锋 林彬辉 苏新华 郭丽清 黄志鹏 关雄 |
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| 作者单位： | [1]福建师范大学生命科学学院,福州350108 [2]福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州350002 |
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| 基金项目： | 863
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国家自然科学基金
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教育部博士点基金
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| 摘 要： | AHLs是革兰氏阴性细菌在增殖过程中产生的一类信号分子，与其致病性密切相关。AiiA蛋白作为一种胞内解酯酶．能水解致病菌产生的AHb分子，使内酯环开环后不能再激活某些胞外酶的表达．从而极大地减弱了细菌的致病性。本研究从苏云金芽孢杆菌LLB15中分离编码aiiA基因的质粒DNA。用PCR方法克隆面讲基因，并利用pET载体构建6-His融合表达质粒pET29a-aiiA,转化E.coli BL21（DE3）菌株，并筛选得到E.coli BL21（DE3）-pET29a-aiiA工程菌。在20℃的低温和0．8mmol／LIPTG条件下。经25h的诱导表达，获得了54．4ug／mL可溶性AiiA蛋白。通过镍柱亲和层析，在国内外首次纯化了带6-His标记的AiiA蛋白。水解活性和抗病性检测表明，该蛋白能水解AHLs分子．对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用。
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| 关 键 词： | aiiA基因 可溶性表达分离纯化 植物病害防治 |
SOLUBLE EXPRESSION OF AlIA PROTEIN AND ANALYSIS OF ITS ANTIMICROBIAL ACTIVITY |
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| YANG Mei ZHANG Feng LIN Bin Hui SU Xin Hua GUO Li Qing HUANG Zhi Peng GUAN Xiong.SOLUBLE EXPRESSION OF AlIA PROTEIN AND ANALYSIS OF ITS ANTIMICROBIAL ACTIVITY[J].Journal of Molecular Cell Biology,2008,41(6). |
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| Authors: | YANG Mei ZHANG Feng LIN Bin Hui SU Xin Hua GUO Li Qing HUANG Zhi Peng GUAN Xiong |
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| Institution: | 1;2;~1 College of Life Sciences;Fujian Normal University;Fuzhou 350108;China;~2 Key Laboratory of Biopesticide and Chemical Biology;Fujian Agriculture and Forestry University;Ministry of Education;Fuzhou 350002;China |
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| Abstract: | AHLs are signaling molecules produced by Gram-negative bacterium during their proliferation.These molecules are closely related with bacteria pathogenicity.AiiA protein,function- ing as a intracellular lactonase,hydrolyses AHLs at lactone loop in the molecule to reduce its bio- logical activity and also dramatically reduces pathogenicity of bacterium at the same time.In this study,DNA fragment encoding aiiA gene was amplified from the plasmid derived from Bacillus thuringiensis by PCR.Expression vector,pET2... |
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| Keywords: | aiiA gene Soluble expression Purification Plant disease control |
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