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生长抑素受体基因特异性shRNA慢病毒表达质粒的构建
引用本文:李敏,郝林琳,刘松财,张永亮.生长抑素受体基因特异性shRNA慢病毒表达质粒的构建[J].现代生物医学进展,2008,8(3):421-423.
作者姓名:李敏  郝林琳  刘松财  张永亮
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
2. 华南农业大学,广州,510095
摘    要:目的:设计并合成生长抑素受体SSTR5基因siRNA序列,并构建其短发夹shRNA慢病毒表达质粒.方法:以小鼠SSTR5基因为靶序列,用在线软件分析、设计并合成其有效siRNA,退火形成双链DNA后,与经BamH I和EcoR I双酶切线性化慢病毒表达载体pSHR-Pμro/GFP连接,产生pLV-shSSTR5重组慢病毒质粒.将重组质粒转化大肠杆菌DH 5α感受态细胞,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.结果:构建的重组表达质粒PCR产物为161bp,其中插入的SSTR5-siRNA片段为61bp,测序结果与参考序列完全一致.结论:成功构建了小鼠SSTR5基因特异性shRNA慢病毒表达质粒,为进一步采用RNAi技术研究小鼠SSTR5基因表达对其生长情况的影响奠定了基础.

关 键 词:SSTR5  RNAi  慢病毒表达载体  生长抑素  受体  基因特异性  shRNA  病毒  重组表达质粒  Gene  Targeting  Plasmids  Expression  Identification  影响  生长情况  基因表达  技术研究  RNAi  完全  参考序列  测序鉴定  结果
文章编号:1673-6273(2008)03-0421-03
修稿时间:2007年9月28日

Construction and Identification of shRNA Lentiviral Expression Plasmids Targeting into SSTR5 Gene
LI Min,HAO Lin-lin,LIU Song-cai,ZHANG Yong-liang.Construction and Identification of shRNA Lentiviral Expression Plasmids Targeting into SSTR5 Gene[J].Progress in Modern Biomedicine,2008,8(3):421-423.
Authors:LI Min  HAO Lin-lin  LIU Song-cai  ZHANG Yong-liang
Abstract:
Keywords:
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