| hAng-1真核表达载体的构建及其在MSCs中的表达 |
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| 引用本文： | 吴华,李杰,蒋树林,陈巍,李大为.hAng-1真核表达载体的构建及其在MSCs中的表达[J].现代生物医学进展,2013,13(18):3441-3444. |
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| 作者姓名： | 吴华 李杰 蒋树林 陈巍 李大为 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学附属第二医院 黑龙江哈尔滨150086 |
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| 摘 要： | 目的:通过基因重组技术,构建人血管生成素-1(human angiopoietin 1,hAng-1)真核表达载体体系,并将其转染至大鼠的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)内进行培养,进而验证hAng-1的表达.方法:将hAng-1编码序列(互补脱氧核糖核酸)通过酶切,插入至pcDNA3.1(+)质粒的多克隆位点,构建质粒pcDNA 3.1 (+)/hAng-1真核表达质粒；重组质粒经脂质体介导转染鼠MSCs.应用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)等方法检测hAng-1的表达情况.结果:pcDNA 3.1 (+)/hAng-1真核表达质粒转染鼠MSCs后,应用流式细胞仪检测,转染效率约为15％.同时应用RT-PCR能够检测出目的基因mRNA,Western blot能够检出hAng-1的蛋白表达.结论:本实验通过基因重组技术,构建的pcDNA3.1 (+)/hAng-1真核表达载体能够在转染的鼠MSCs中表达,且表达较为持续,为hAng-1基因应用于基因治疗的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | HAng-1 MSCs 表达 |
Construction of Eukaryotic Expression Plasmid of pcDNA3.1/human Angiopoietin-1 and its Expression in Mesenchymal Stem Cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HAng-1 MSCs Expression |
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