| 粉尘螨过敏原蛋白Der f 3 的表达纯化及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 巫娟,张俊艳,何颖,陈惠芳,李碧舟,关志澳,陶爱林.粉尘螨过敏原蛋白Der f 3 的表达纯化及活性鉴定[J].现代生物医学进展,2016,16(1):54-57. |
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| 作者姓名： | 巫娟 张俊艳 何颖 陈惠芳 李碧舟 关志澳 陶爱林 |
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| 作者单位： | 广州医科大学附属第二医院广东省过敏反应与免疫重点实验室；呼吸疾病国家重点实验室变态反应研究室 |
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| 基金项目： | 国家重大科技专项重大课题（2014ZX08011-005）；国家重大科技专项重点课题（2014ZX08011-005B）；
国家自然科学基金项目（81373128） |
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| 摘 要： | 目的:制备有生物学活性的粉尘螨过敏原蛋白Der f 3。方法:构建带有StrepⅡ标签的原核表达体系Rosetta-p ET44a-Der f 3高效表达目的蛋白,分别用梯度透析法和亲和层析法对其进行复性纯化,通过Western Blot试验验证目的蛋白的有效表达,最后用丝氨酸蛋白酶特异荧光底物及粉尘螨过敏病人血清分别鉴定目的蛋白的酶学活性及免疫学活性。结果:利用原核表达体系成功表达了目的蛋白Der f 3,Western Blot结果显示有目的条带出现。复性纯化后的过敏原蛋白Der f 3能够成功降解丝氨酸蛋白酶特异性荧光底物,ELISA试验结果显示该蛋白血清特异性Ig E在4级以上粉尘螨过敏病人中阳性率为4%。结论:成功获得有酶学活性及免疫学活性的粉尘螨过敏原蛋白Der f 3,为生产高质量的诊断试剂和疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | Der f 3 复性 酶学活性 免疫学活性 |
Expression, Purification and Biological Activity Identification of House Dust
Mite Allergen Der f 3 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Der f 3 Renaturation Enzymatic activity Immunological activity |
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