| 基于亲和层析方法研究栀子苷的药物靶标 |
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| 引用本文： | 张琦,张子剑,谭琰,王旭,赵洁,张傲哲,李亚楠,万亮琴,华茜.基于亲和层析方法研究栀子苷的药物靶标[J].现代生物医学进展,2016,16(15):2811-2815. |
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| 作者姓名： | 张琦 张子剑 谭琰 王旭 赵洁 张傲哲 李亚楠 万亮琴 华茜 |
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| 作者单位： | 北京中医药大学基础医学院；2 北京中医药大学科研实验中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81473546） |
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| 摘 要： | 目的:运用亲和层析方法初步探索栀子苷的特异结合蛋白。方法:采用环氧氯丙烷(Epichlorohydrin,ECH)作为活化试剂对琼脂糖凝胶进行环氧基修饰,通过偶联栀子苷与环氧活化的琼脂糖凝胶(epoxy activated Sepharose CL-6B,EAS6B),制备以栀子苷为配基的亲和介质,以高效液相色谱法验证其偶联。利用栀子苷-EAS6B亲和介质,从小鼠脑组织总蛋白中筛选特异结合蛋白。结果:优化偶联条件后,得到最佳的活化反应条件:15%ECH、0.8 mol/L Na OH于37℃反应3 h,环氧基密度达到122μmol/m L,琼脂糖凝胶亲和介质的偶联量为19.53%,偶联率为17.08μmol/m L。从小鼠脑组织总蛋白中筛选得到3个栀子苷特异结合蛋白的条带,经质谱鉴定,发现主要是由热休克蛋白、脑酸溶性蛋白和谷氨酰胺合成酶等组成。结论:确立了琼脂糖凝胶环氧活化的最佳条件,制备了栀子苷-EAS6B亲和介质并应用其筛选出栀子苷的结合蛋白。
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| 关 键 词： | 栀子苷 亲和层析 环氧活化琼脂糖凝胶 高效液相色谱 |
Study on Target Proteins of Geniposide based on Affinity Chromatography |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Geniposide Affinity chromatography ECH HPLC |
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