| 腺病毒介导的Her2基因RNAi载体的构建和鉴定 |
| |
| 引用本文： | 高洋,杨红,闫岩,刘艳丽,张芳琳,吴兴安,辛晓燕.腺病毒介导的Her2基因RNAi载体的构建和鉴定[J].现代生物医学进展,2008,8(8):1409-1411,1408. |
| |
| 作者姓名： | 高洋 杨红 闫岩 刘艳丽 张芳琳 吴兴安 辛晓燕 |
| |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院妇产科,西安,710032
2. 第四军医大学基础医学部微生物学教研室,西安,710032 |
| |
| 摘 要： | 目的:构建腺病毒介导的Her2基因RNAi栽体.方法:构建含有Her2基因片断的siRNA质粒Her2-pSuppressor,通过特异性酶切将目的基因与穿梭载体pshuttle相连,再通过特异性酶切位点将目的片断与腺病毒DNA相连,并用PCR和酶切鉴定方法进行筛选和鉴定,获得重组腺病毒DNA.以Pac Ⅰ酶切线性化后转染包装含有腺病毒E1的HEK293细胞.以软琼脂平板上的空斑数量计算重组腺病毒的的滴度.结果:Xba Ⅰ Mlu Ⅰ双酶切鉴定Her2a-RNAi/pShuttle和Her2b.RNAi/pShuttle阳性重组子获得304bp的目的片段,重组腺病毒载体Adeno-Her2a-RNAi和Adeno-Her2b-RNAi经PCR扩增出同样大小片断,经线性化后用脂质体法转染293细胞,观察到细胞病变效应.病毒滴度达1.2× 108PFU/mL.结论:成功构建了Adeno-Her2-RNAi,为肿瘤的基因治疗奠定了良好的基础.
|
| 关 键 词： | Her2 RNA干扰 基因 腺病毒 重组 病毒 肿瘤的基因治疗 RNAi vector 毒载体 adenovirus mediated gene containing construction 效应 脂质体法 大小 重组子 阳性 酶切鉴定 结果 滴度 数量计算 空斑 平板 |
Identification and construction of a RNAi vector containing Her 2 gene mediated by adenovirus |
| |
| GAO Yang,YANGHong,YAN Yan,LIU Yan-li,ZHANG Fang-lin,WU Xing-an,XIN Xiao-yan.Identification and construction of a RNAi vector containing Her 2 gene mediated by adenovirus[J].Progress in Modern Biomedicine,2008,8(8):1409-1411,1408. |
| |
| Authors: | GAO Yang YANGHong YAN Yan LIU Yan-li ZHANG Fang-lin WU Xing-an XIN Xiao-yan |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
