人源化YKL-40中和抗体（Rosazumab） 体外阻断血管再生

摘要 目的：血管再生是实体肿瘤的生长和恶性转移的一个必须病理过程，阻断这一过程能够有效阻止恶性肿瘤的发生发展。YKL-40是血管再生因子，能刺激肿瘤的血管再生。本文探讨了一个原创性人源化抗YKL-40单克隆抗体（Rosazumab, 命名为洛沙单抗）阻断YKL-40血管生成的体外功能。方法：Western Blot检测洛沙单抗对分泌和重组YKL-40蛋白的特异性结合；Western Blot及考马斯亮蓝染色检测该抗体的抗体特异性和纯度；Live/Dead染色试验检测抗体的细胞毒性。以人微血管内皮细胞（Human microvascular endothelial cells, HMVECs）为研究对象，引入重组YKL-40蛋白或脑胶质瘤细胞（Glioblastoma serum-differentiated cells, GSDCs）的条件培养基进行培养。Transwell试验检测该抗体对HMVECs迁移力的影响，并用Matrigel试验检测对微管形成的作用。结果：洛沙单抗可特异性结合YKL-40，考马斯亮蓝染色进一步证明其纯度及特异性。体外血管再生试验包括细胞迁移力和微管形成证明该抗体可以有效中和重组YKL-40蛋白及肿瘤细胞条件培养基中的YKL-40，抑制HMVECs的迁移和血管形成。结论：洛沙单抗是首创的人源化中和YKL-40的抗体，其特异性高，细胞毒性低，能显著抑制YKL-40血管再生功能，为下一步体内试验奠定基础。本研究可为YKL-40诱导的肿瘤血管生成及恶性肿瘤转移提供一种新的治疗手段。