| 严重发热伴血小板减少综合征病毒培养以及病毒滴度检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 胡南南,鲍倡俊,金 柯,胡建利,刘 源,岳 明,颜莹莹,韩亚萍,李 军.严重发热伴血小板减少综合征病毒培养以及病毒滴度检测方法的建立[J].现代生物医学进展,2018(9):1607-1610. |
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| 作者姓名： | 胡南南 鲍倡俊 金 柯 胡建利 刘 源 岳 明 颜莹莹 韩亚萍 李 军 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院感染病科;江苏省疾病预防与控制中心急性传染病防控所 |
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| 基金项目： | 国家重大科技专项（2017ZX10203202-002-005）；科技部艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项（2017ZX10202201-003-009） |
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| 摘 要： | 目的:建立严重发热伴血小板综合征病毒(SFTSV)培养和病毒滴度检测的方法,为其致病机制研究奠定基础。方法:选取生长良好的Vero细胞铺六孔板接种SFTSV,每隔24 h收集培养病毒上清检测SFTSV病毒复制拷贝数,从而选取最佳时间点收获病毒液并用浓缩离心管浓缩病毒液,保存备用。将SFTSV病毒液进行10倍比稀释,每梯度200μL接种生长良好的单层Vero细胞,用3 m L高压灭菌的甲基纤维素-DMEM覆盖物覆盖每孔Vero细胞,约9 d后温和去除甲基纤维素-DMEM覆盖物,经预冷的4%甲醛固定细胞后,用结晶紫染色,PBS洗脱3次,计算空斑数。结果:根据病毒繁殖生长情况,病毒在第4 d后达复制高峰并随后进入平台期,第8天病毒复制开始下降。参照甲基纤维素-结晶紫空斑法实验结果,病毒滴度为6×106PFU/m L。结论:SFTSV病毒培养以及滴度检测方法成功建立,选取4天后收获病毒上清最佳,甲基纤维素-结晶紫空斑法形成的空斑清晰可数。
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| 关 键 词： | 严重发热伴血小板减少综合征病毒 非洲绿猴肾细胞 空斑试验 病毒滴度检测 |
| 收稿时间： | 2018/1/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/2/10 0:00:00 |
Development of Methods for Culture and Titer Determination of Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SFTSV Vero Plaque assay Virus titer detection |
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