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| Real-time TaqMan RT-PCR快速检测犬瘟热病毒方法的研究 | |
| 引用本文： | 王君玮,孙承英,姜平,王志亮,张维,李林,赵永刚,王珊,任炜杰.Real-time TaqMan RT-PCR快速检测犬瘟热病毒方法的研究[J].现代生物医学进展,2007,7(2):265-268. |
| 作者姓名： | 王君玮 孙承英 姜平 王志亮 张维 李林 赵永刚 王珊 任炜杰 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学动物医学院,南京,210095;中国动物卫生与流行病学中心,青岛,266114 2. 中国动物卫生与流行病学中心,青岛,266114 3. 南京农业大学动物医学院,南京,210095 |
| 基金项目： | 山东省青岛市科技发展基金 |
| 摘 要： | 按照犬瘟热(CDV)N基因序列,设计合成了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了Real-time荧光定量RT-PCR技术,对细胞培养物、肝脏、肺脏、脑、脾脏、淋巴结以及鼻腔拭子等组织病料中的CDV进行了特异性检测和敏感性试验。同时,利用建立的Real-time荧光定量RT-PCR方法与常规RT-PCR以及韩国BIOINDIST生产的BIT RAPID CDV检测试剂盒对57份临床样品进行了检测。结果:用20pmol/mL的引物浓度各1uL和20pmol/mL的探针浓度0．3uL,获得的荧光信号最强,曲线平滑。敏感性高,可检测到1．24×10—3ng/uL的病毒RNA;特异性强,与NDV、AIV、NiPV等RNA病毒不发生交叉反应。试验重复性的变异系数(CV)分别为2．3%、2．5%和4．2%;与常规RT-PCR和BIOINDIST生产的BIT RAPID CDV检测试剂盒相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点。 |
| 关 键 词： | 犬瘟热病毒 荧光定量RT-PCR 检测 |
| 文章编号： | 1673-6273（2007）02-0265-04 |
| 收稿时间： | 2006-11-21 |
| 修稿时间： | 2006-12-20 |
Study on Rapid Test Method for Canine Distemper Virus by Real-time TaqMan RT-PCR |
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| WANG Jun-wei,SUN Cheng-ying,JIANG Ping,WANG Zhi-liang,ZHANG Wei,LI Lin,ZHAO Yong-gang,WANG Shan,REN Wei-jie.Study on Rapid Test Method for Canine Distemper Virus by Real-time TaqMan RT-PCR[J].Progress in Modern Biomedicine,2007,7(2):265-268. | |
| Authors: | WANG Jun-wei SUN Cheng-ying JIANG Ping WANG Zhi-liang ZHANG Wei LI Lin ZHAO Yong-gang WANG Shan REN Wei-jie |
| Abstract: | |
| Keywords: | Real-timePCR |
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