| 毕赤酵母菌高效表达乙肝表面抗原的研究 |
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| 引用本文： | 杜云英,郭秋华,何小维.毕赤酵母菌高效表达乙肝表面抗原的研究[J].现代生物医学进展,2009,9(17). |
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| 作者姓名： | 杜云英 郭秋华 何小维 |
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| 作者单位： | 华南理工大学轻工与食品学院,广东,广州,510640 |
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| 基金项目： | 广东省产学研结合项目,广东省科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的:筛选高效表达HBsAg的毕赤酵母茵,制备目的蛋白.方法:从已确诊的乙肝病人血清中提取DNA,PCR扩增HBVS基因,将其分别克隆入毕赤酵母胞内表达栽体pPICZA中.构建重组质粒pPICZA-S和pPICZA-SH,经Sac I线性化后,LiCI化学法转化入酵母茵株GS115、X-33、KM71H和SMD1168.结果:诱导表达后的GS115工程茼单位体积的培养基所得的抗原含量最高,诱导培养基中加入0.1%酪蛋氨基酸后,可抑制目的蛋白的水解,有利于目的蛋白的表达,粗略估算表达量为15.3mg/L,最佳收获时间为72 h.结论:经SDS-PAGE和Westcrn-blot分析表明,所得产物为乙肝表面抗原S蛋白.
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| 关 键 词： | 乙肝表面抗原 毕赤酵母茵 表达 |
The high expression of HBsAg in Pichia pastoris |
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| DU Yun-ying,GUO Qiu-hua,HE Xiao-wei.The high expression of HBsAg in Pichia pastoris[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(17). |
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| Authors: | DU Yun-ying GUO Qiu-hua HE Xiao-wei |
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