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结核分枝杆菌肝素结合血凝素蛋白的表达、纯化及免疫学特性的初步研究
引用本文:江鹰,赵勇,张海,毛峰峰,张彩勤,白冰,师长宏.结核分枝杆菌肝素结合血凝素蛋白的表达、纯化及免疫学特性的初步研究[J].现代生物医学进展,2011,23(23).
作者姓名:江鹰  赵勇  张海  毛峰峰  张彩勤  白冰  师长宏
作者单位:第四军医大学实验动物中心 陕西西安710032
摘    要:目的:克隆肝素结合血凝素(HBHA)基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化,利用获得的蛋白进行免疫学特性的初步研究.方法:用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出HBHA基因片段,克隆至pMDI8-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pQE80L并在大肠杆菌DH5α中表达,表达蛋白经SDS-PAG及Western-blot分析后,亲和层析法纯化蛋白.获得的蛋白免疫BALB/c小鼠,测定血清抗体水平及IgG2a/IgG1比例.结果:克隆了HBHA基因,并成功表达该蛋白,SDS-PAGE及Western-blot分析表明表达产物正确.通过亲和层析法得到28kD纯化蛋白,与文献报道相符,诱导小鼠可使CD4+和CD8+细胞数明显增加.结论:成功获得了纯化的HBHA蛋白,明确了HBHA蛋白的免疫学特性,为进一步研究HBHA蛋白的致病机理及新型疫苗的开发提供了实验依据.

关 键 词:结核分枝杆菌  HBHA  表达  纯化

Purification of Heparin-binding Haemagglutinin Adhesin from Mycobacterium Tuberculosis and Preliminary Study the Immunological Characteristics of the Protein
JIANG Ying,ZHAO Yong,ZHANG Hai,MAO Feng-feng,ZHANG Cai-qin,BAI Bing,SHI Chang-hong.Purification of Heparin-binding Haemagglutinin Adhesin from Mycobacterium Tuberculosis and Preliminary Study the Immunological Characteristics of the Protein[J].Progress in Modern Biomedicine,2011,23(23).
Authors:JIANG Ying  ZHAO Yong  ZHANG Hai  MAO Feng-feng  ZHANG Cai-qin  BAI Bing  SHI Chang-hong
Abstract:
Keywords:
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