藿香蓟叶提取物对大鼠创伤性骨关节炎的治疗作用

摘要 目的：探究藿香蓟叶提取物（ACLE）对创伤性骨关节炎（PTOA）模型大鼠的治疗作用及其可能的分子机制。方法：SPF级雄性SD大鼠采用前交叉韧带切断法构建PTOA大鼠模型，然后将建模成功的大鼠随机分为模型组、藿香蓟叶提取物2.5 g组（ACLE 2.5 g组）、藿香蓟叶提取物5 g组（ACLE 5 g组）和藿香蓟叶提取物10 g组（ACLE 10 g组），每组21只。另取21只SD大鼠设为假手术组，大鼠只执行前交叉韧带暴露手术，但是不切断。ACLE 2.5 g组、ACLE 5 g组和ACLE 10 g组大鼠在造模结束后分别灌胃给药，剂量分别为2.5 g/kg、5 g/kg和10 g/kg，持续给药处理8周。假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水每日灌胃处理，同样持续干预处理8周。给药结束后，收集各组大鼠的血清、膝关节灌洗液和膝关节软骨组织。采用HE染色（Mankin''s评分）和番红O+固绿染色（OARSI评分）评估大鼠关节损伤情况。采用ELISA试剂盒检测大鼠血清中ALP、BGP和CTX-Ⅰ水平，以及大鼠血清和关节灌洗液中TNF-α、IL-6和IL-1β水平。采用试剂盒检测大鼠血清和关节灌洗液中MDA、SOD、GSH-Px和ROS水平。采用Western blot检测大鼠软骨组织中Aggrecan、SOX-9、Col Ⅱ、MMP-13、Wnt1、β-catenin、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果：模型大鼠的膝关节软骨组织损伤严重，软骨层状组织结构遭受破坏；ACLE 2.5 g组、ACLE 5 g组和ACLE 10 g组大鼠膝关节软骨组织结构和病理状态均得到不同程度的恢复。与模型组比较，ACLE 2.5 g组、ACLE 5 g组和ACLE 10 g组大鼠Mankin''s和OARSI的评分值均降低（P<0.01）。与模型组比较，ACLE 2.5 g组、ACLE 5 g组和ACLE 10 g组大鼠血清中ALP和BGP水平升高，CTX-Ⅰ水平降低（P<0.05）。与模型组比较，ACLE 2.5 g组、ACLE 5g组和ACLE 10 g组大鼠血清和膝关节灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-?琢、NO和MDA水平均降低（P<0.05），SOD和GSH-Px水平均升高（P<0.05）。与模型组比较，ACLE 2.5 g组、ACLE 5 g组和ACLE 10 g组大鼠关节软骨组织中Aggrecan、SOX-9、ColⅡ和Bcl-2蛋白表达水平均升高（P<0.05），MMP-13、Wnt1、β-catenin和Bax蛋白表达水平均降低（P<0.05）。结论：ACLE能够降低PTOA大鼠膝关节软骨组织中炎症反应水平，增强抗氧化能力；抑制Wnt/β-catenin通路的过度激活，通过升高Aggrecan、ColⅡ、SOX-9和Bcl-2的表达，促进软骨细胞外基质的恢复，并抑制软骨细胞的凋亡，从而改善PTOA大鼠软骨组织损伤程度。

Therapeutic Effect of Leaf Extract of Ageratum conyzoides L. on Post-traumatic Osteoarthritis in Rats