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转基因小鼠模型的载体构建和在人肝癌HepG2细胞中的表达
引用本文:秦伟伟,葛银林,李芳芳,薛关兰,徐宏伟.转基因小鼠模型的载体构建和在人肝癌HepG2细胞中的表达[J].现代生物医学进展,2009,9(1).
作者姓名:秦伟伟  葛银林  李芳芳  薛关兰  徐宏伟
基金项目:国家自然科学基金,教育部资助项目
摘    要:目的:构建转基因小鼠模型的载体并检测在人肝癌HepG2中的表达效果.方法:将n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat-1插入到真核表达载体(pcDNA3.1(+)myc-HisA)中,构建重组表达载体pcDNA3.1(+)myc-His A-fat-1,用脂质体介导的方法转染到人肝癌HepG2细胞中,RT-PCR检测fat-l基因的表达,MTT法分析fat-l基因对HepG2细胞增殖的影响,气相色谱分析检测fat-l基因对HepG2细胞n-6/n-3多聚不饱和脂肪酸(PUFAs)比例的影响.结果:成功地构建了真核表达裁体peDNA3.1(+)myc-HisA-fat-1,并能在HepG2细胞内有效异源表达.48h后可检测到fat-l mRMA的条带.与对照细胞相比,fat-l基因有效地抑制了人肝癌细胞HepG2细胞的增殖(70%,p<0.01),降低了n-6/n-3 PUFAs比例.结论:pcDNA3.1(+)myc-His A-fat-l重组载体构建成功并能在肝癌细胞中有效的表达,可以作为下一步转基因小鼠的合适载体.

关 键 词:栽体构建  多不饱和脂肪酸  HepG细胞  基因表达

Construction of Vector of Transgenic Mice Model and Expression of Vector in Human Liver Cancer HepG2 Cells
QIN Wei-wei,GE Yin-lin,LI Fang-fang,XUE Mei-lan,XU Hong-wei.Construction of Vector of Transgenic Mice Model and Expression of Vector in Human Liver Cancer HepG2 Cells[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(1).
Authors:QIN Wei-wei  GE Yin-lin  LI Fang-fang  XUE Mei-lan  XU Hong-wei
Abstract:
Keywords:
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