| 人黑色素瘤相关抗原Restin的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 王卫华,路凡,沈琦.人黑色素瘤相关抗原Restin的克隆和表达[J].现代生物医学进展,2009,9(23):4407-4410. |
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| 作者姓名： | 王卫华 路凡 沈琦 |
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| 作者单位： | 1. 第四军大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032;解放军总医院老年消化科,北京,100853
2. 第四军大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的:通过对原核表达载体、表达条件和宿主菌的优化,利用原核表达系统有效表达可溶性的人Restin融合蛋白.方法:应用PCR方法扩增获得Restin编码区,克隆入原核表达载体pET44a(+),分别转化E.coli BL21(DE3)和E.coli Rosetta-gamiTM2(DE3),不同的IPTG浓度诱导表达Restin重组融合蛋白,SDS-PAGE和Western Blot分析表达产物.结果:成功构建了重组载体pET44a(+)-Restin,并在E.coli Rosetta-gamiTM2(DE3)中获得了可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的8.9%.结论:可溶性Restin融合蛋白的获得为后续的功能研究、蛋白制备及其抗体研制奠定了基础.
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| 关 键 词： | Restin 原核表达 重组融合蛋白 |
Cloning and expression of Restin,a human melanoma associated antigen |
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| WANG Wei-hua,LU Fan,SHEN Qi.Cloning and expression of Restin,a human melanoma associated antigen[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(23):4407-4410. |
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| Authors: | WANG Wei-hua LU Fan SHEN Qi |
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