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平滑肌肌球蛋白轻链激酶N端删除载体的构建
引用本文:吕广艳,崔颖,于守鹏,陈海波,曲淑贤,高船舟,高颖.平滑肌肌球蛋白轻链激酶N端删除载体的构建[J].现代生物医学进展,2009,9(19).
作者姓名:吕广艳  崔颖  于守鹏  陈海波  曲淑贤  高船舟  高颖
作者单位:1. 辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室,辽宁,大连,116044
2. 大连医科大学生化教研室,辽宁,大连,116044
3. 辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室,辽宁,大连,116044;大连医科大学生化教研室,辽宁,大连,116044
摘    要:目的:构建重组平滑肌肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)N端删除栽体,为研究平滑肌MLCK的分子机制提供研究模型.方法:以重组质粒pCoid/155为模板,根据其待删除序列(N端1-41个氨基酸)设计上下游引物,行PCR扩增.将扩增片段以NdeI/EeoRl双酶切,产物行琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因.将目的基因与栽体连接,转化至大肠杆菌.筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序.结果:用NdeI和EcoRI双酶切重组质粒pCold/155,琼脂糖凝胶电泳显示得到约4.4kb栽体和约3.4kb的MLCK片段.阳性克隆经测序证实MLCK的N端41个氨基酸序列已被成功删除.结论:成功构建了重组MLCK N端删除栽体 pCold/155/D41.

关 键 词:肌球蛋白轻链激酶  肌动蛋白  重组载体

Construction of Recombinant Vector of N-terminus Deleted Smooth Muscle Myosin Light Chain Kinase
LV Guang-yan,CUI Ying,YU Shou-peng,CHEN Hai-bo,QU Shu-xin,GAO Chuan-zhou,GAO Ying.Construction of Recombinant Vector of N-terminus Deleted Smooth Muscle Myosin Light Chain Kinase[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(19).
Authors:LV Guang-yan  CUI Ying  YU Shou-peng  CHEN Hai-bo  QU Shu-xin  GAO Chuan-zhou  GAO Ying
Abstract:
Keywords:
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