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毛细管内均相辣根过氧化物酶(HRP)与核酸杂交偶联HRP 催化化学 发光比较研究
引用本文:向安汪钦包晗颜真郭晏海.毛细管内均相辣根过氧化物酶(HRP)与核酸杂交偶联HRP 催化化学 发光比较研究[J].现代生物医学进展,2011,11(5):857-860.
作者姓名:向安汪钦包晗颜真郭晏海
作者单位:第四军医大学全军基因诊断技术研究所,陕西,西安,710032
基金项目:国家"十一五""艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项,陕西省自然科学基金项目
摘    要:目的:了解毛细管内核酸偶联和游离辣根过氧化物酶(HRP)催化化学发光差异。方法:不同浓度HRP和经核酸杂交固定于毛细管内壁HRP催化化学发光反应。结果:①游离HRP催化化学发光线性检测范围窄(2.7×10-5-1.3×10-6mg/ml,R2>0.96),下限为1.0×10-7mg/ml;②2.0×1014-2.0×106copies/ml的5μl单链DNA杂交后,1.0-10min时DNA浓度M对数(lgM)与化学发光I值线性相关(R2>0.99),且大于阴性I值平均数+3倍标准偏差(s.d);③5.0×1011-5.0×106copies/ml的5μl PCR产物杂交后,10min内PCR产物对数lgM与I值线性相关(R2>0.97),且大于阴性I值平均数+3倍标准偏差(s.d)。4.0-7.0min内lgM与I值的R2>0.99,3次平行检测标准偏差<5.0%。结论:毛细管内核酸杂交的HRP催化化学发光检测线性范围宽、灵敏度高、底物用量少,有望用于临床核酸分子杂交检测。

关 键 词:微体系  固定化酶  辣根过氧化酶  化学发光

Differences between coupling of nucleic acid hybridization and catalytic chemiluminescence of free horseradish peroxidase in capillary tube
XIANG An,WANG Qin,BAO Han,YAN Zhen,GUO Yan-hai.Differences between coupling of nucleic acid hybridization and catalytic chemiluminescence of free horseradish peroxidase in capillary tube[J].Progress in Modern Biomedicine,2011,11(5):857-860.
Authors:XIANG An  WANG Qin  BAO Han  YAN Zhen  GUO Yan-hai
Institution:△(Department of Pharmacogenomics,School of Pharmacy,Fourth Military Medical University,710032,Xi an China)
Abstract:
Keywords:mini-system  immobilized enzyme  Horseradish peroxidase  chemiluminesence
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