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抗 Trx 单克隆抗体用于血吸虫病诊断的研究 *
引用本文:吴玉龙,程 梅 刘春会 耿 丽 张 珍 杜镇镇 李波清 李雍龙.抗 Trx 单克隆抗体用于血吸虫病诊断的研究 *[J].现代生物医学进展,2014,14(6):1057-1061.
作者姓名:吴玉龙  程 梅 刘春会 耿 丽 张 珍 杜镇镇 李波清 李雍龙
作者单位:1 滨州医学院病原生物学教研室 山东 烟台 264003; 2 南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室 江苏 南京 210029; 3 滨州医学院护理学院 山东 滨州 256603; 4 华中科技大学基础医学院人体寄生虫学教研室 湖北 武汉 430030
基金项目:国家自然科学基金项目 (81072429 )
摘    要:摘要 目的: 建立双抗体夹心 ELISA 法检测日本血吸虫硫氧还蛋白 (Thioredoxin,Trx )。方法: 用重组日本血吸虫 Trx (rTrx ) 蛋白免 疫 BALB/c 小鼠, 筛选高滴度、 高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心 ELISA 法。通过检测日本血吸虫排泄 - 分泌物 ( excretorysecretions,ES ) 与 rTrx 的浓度评价该方法的敏感性; 通过对健康人血清的检测确定其特异性; 通过对布氏姜片吸虫病、 华支睾吸虫 病、 卫氏并殖吸虫病、 囊虫病患者血清进行交叉反应试验, 评价该方法的特异性。 结果: 获得 2 株稳定分泌抗 rTrx 蛋白单克隆抗体 的杂交瘤细胞株, 命名为 McTrx1 和 McTrx2。以 McTrx1 为包被抗体, HRP-McTrx2 为酶标抗体, 建立的双抗体夹心 ELISA 可检 测出 ES 的最低浓度为 4.8 μg/ml, 检测出 rTrx 的最低浓度为 1.2 μg/ml。 该方法的特异性为 96%。 结论: 以抗 rTrx 蛋白单克隆抗体 McTrx1 与 McTrx2 为基础建立的双抗体夹心 ELISA 法具有较高的特异性。

关 键 词:日本血吸虫  单克隆抗体  硫氧还蛋白    双抗夹心  ELISA

Application of Double Antibody Sandwich ELISA for Detection of Trx of Schistosoma Japonicum *
WU Yu-long,CHENG Mei,LIU Chun-hui,GENG Li,ZHANG Zhen,DU Zhen-zhen,LI Bo-qing,LI Yong-long.Application of Double Antibody Sandwich ELISA for Detection of Trx of Schistosoma Japonicum *[J].Progress in Modern Biomedicine,2014,14(6):1057-1061.
Authors:WU Yu-long  CHENG Mei  LIU Chun-hui  GENG Li  ZHANG Zhen  DU Zhen-zhen  LI Bo-qing  LI Yong-long
Abstract:
Keywords:Schistosoma Japonicum  Monoclonal antibody  Trx  Double antibody sandwich ELISA
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