| 不同方法制备大鼠肝脏脱细胞支架及其免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 姜楠,季茹,王建锋,韩炜,李伟民,曹阳,王德盛,窦科峰.不同方法制备大鼠肝脏脱细胞支架及其免疫原性研究[J].现代生物医学进展,2013,13(5):844-849. |
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| 作者姓名： | 姜楠 季茹 王建锋 韩炜 李伟民 曹阳 王德盛 窦科峰 |
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| 作者单位： | 第四军医大学附属西京医院肝胆胰脾外科 陕西西安710032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863项目) |
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| 摘 要： | 目的:肝脏脱细胞支架(decellularized liver bioscaffold,DLB)在组织工程研究中具有良好前景,但对DLB的免疫原性尚未见探讨.本研究利用不同方案制备大鼠DLB,检测支架成分和体内重塑反应,为制备出低免疫原性的DLB提供改进依据.方法:选取文献报道的三种方案(分别以SDS,Triton X-100和NP-40为主要洗脱成分),制备F344大鼠DLB,进行HE和Masson染色,检测DLB中DNA、氨基葡聚糖(GAG)以及羟脯氨酸(HYP)含量；再将DLB埋植于C57BL/6小鼠的背部皮下,于术后第3、7和14天取出后进行形态学观察和组织学评分.结果:三种方案均成功制备出符合脱细胞标准的大鼠DLB；形态学结果提示TritonX-100和NP-40方案较SDS方案能更好地保护肝脏超微结构；成分检测结果发现NP-40方案去除DNA的能力显著强于SDS和Triton X-100方案(P＜0.05),而对GAG含量的洗脱作用最弱(P＜0.05)；异种体内埋置实验提示NP-40方案制备的DLB引起的免疫反应强度明显弱于SDS和Triton X-100方案,体内重塑结局评分显著高于SDS和Triton X-100方案.结论:与SDS和TritonX-100方案相比,NP-40方案能更有效地去除肝脏DNA,较好地保留GAG,诱导移植受体对DLB的良性重塑反应,为进一步的体内研究提供更优化的支架.
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| 关 键 词： | 脱细胞肝支架 肝组织工程 细胞外基质 免疫原性 |
The Preparation and Immunoreactivity Analysis of Rat Liver Bioscaffolds Decellularized by Three Different Protocols |
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