利用cut&tag技术探究LHX9基因在颗粒细胞的调控机制 |
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引用本文: | 吴 婧,徐 悦,曹 仁,张漫漫,乔 洁,宋怀东.利用cut&tag技术探究LHX9基因在颗粒细胞的调控机制[J].现代生物医学进展,2023(24):4601-4606. |
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作者姓名: | 吴 婧 徐 悦 曹 仁 张漫漫 乔 洁 宋怀东 |
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作者单位: | 上海交通大学医学院附属第九人民医院分子诊断科 上海200001;上海交通大学医学院附属第九人民医院内分泌科 上海 200011;上海科技大学生命科学与技术学院 上海 201210 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(82270826;81873652) |
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摘 要: | 摘要 目的:在人卵巢颗粒细胞癌细胞株KGN中探索转录因子LHX9下游主要的靶基因及其调控。方法:首先我们采用实时荧光定量PCR观察KGN细胞在卵泡刺激素(FSH)干预前后性腺分化和性激素合成过程中重要基因的表达情况,同时我们利用cut&tag测序技术在两组细胞中识别LHX9下游靶基因,并采用双荧光素酶报告实验对重要靶基因NR5A1的调控进行了验证。结果:实时荧光定量PCR结果显示,通过加FSH处理12小时后,LHX9和NR5A1基因的mRNA水平表达降低,相反的,StAR和CYP19A1基因的mRNA水平表达增高;通过cut&tag测序技术和生物信息学分析,我们发现LHX9下游基因主要分布在内吞作用、细胞衰老、肿瘤相关通路、细胞周期、凋亡、卵母细胞减数分裂、雌激素信号转导等通路上。LHX9可以转录调控性腺分化以及类固醇激素合成的一些重要基因,其中包括NR5A1和SOX9等,荧光素酶报告基因证实了LHX9可以直接结合NR5A1基因的启动子区。结论:本研究利用cut&tag测序技术,发现转录因子LHX9对性腺分化和性激素合成的关键基因有转录调控作用,对深入理解LHX9基因对生殖系统的作用具有重要意义。
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关 键 词: | LHX9 cut&tag NR5A1 性腺分化 |
收稿时间: | 2023/6/6 0:00:00 |
修稿时间: | 2023/6/30 0:00:00 |
xploring the Regulatory Mechanism of LHX9 in Granulosa Cell Line by Cut&tag |
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Abstract: | |
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Keywords: | LHX9 cut&tag NR5A1 Gonad differentiation |
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