| 金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株的构建 |
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| 引用本文： | 张晓静,冯世源,杜崇涛,杨勇军,陈巍.金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株的构建[J].现代生物医学进展,2015,15(15):2815-2819. |
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| 作者姓名： | 张晓静 冯世源 杜崇涛 杨勇军 陈巍 |
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| 作者单位： | 吉林大学动物医学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31201908）；973计划（2011CB944404）；长江学者和创新团队发展计划（IRT1248） |
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| 摘 要： | 目的:构建金黄色葡萄球菌(金葡菌)Oat A基因敲除菌株及其回补菌株。方法:以p BT2为载体,构建金葡菌Oat A基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经金葡菌RN4220修饰后电转入金葡菌USA300,利用p BT2载体对温度敏感的特点,在42℃多次传代,筛选出金葡菌Oat A基因敲除菌株。以p LI50为载体,构建p LI50-Oat A全基因回补质粒,电转入金葡菌RN4220,再次抽提后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因回补菌株p Oat A。结果:成功构建基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经RN4220修饰电转入USA300,经PCR及测序鉴定,获得了金葡菌Oat A敲除菌株△Oat A。经PCR及酶切鉴定,确认p LI50-Oat A回补质粒构建成功,通过金葡菌RN4220修饰后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因敲除回补菌株p Oat A。结论:成功构建金黄色葡萄球菌Oat A基因敲除菌株及其回补菌株,为进一步研究金葡菌Oat A的功能及其作用机制奠定基础。
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 OatA 同源重组 基因敲除 基因回补 |
Construction of OatA Deletion Mutant and Complementation of Staphylococcus Aureus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Homologous recombination Gene knockout Genetic complementation |
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