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HistoGel预包埋法在微小组织石蜡切片中的应用
引用本文:窦丹丹,董玲凤,文华,李自立,胡亮.HistoGel预包埋法在微小组织石蜡切片中的应用[J].现代生物医学进展,2015,15(28):5405-5407.
作者姓名:窦丹丹  董玲凤  文华  李自立  胡亮
作者单位:中南大学生殖与干细胞工程研究所;人类干细胞国家工程研究中心
基金项目:国家自然科学基金项目(81372627);湖南省自然科学基金项目(13JJ338); 中南大学研究生自主探索创新基金项目(72150050335)
摘    要:目的:探讨微小组织HistoGel预包埋的石蜡切片制作方法和优势。方法:选择拟胚体(embryoid body, EB)为微小组织,将人 类胚胎干细胞(human Embryonic Stem Cell, hESC)切割成小块,用拟胚体培养基在低贴附培养皿中悬浮培养形成拟胚体。收集拟 胚体,4 %的多聚甲醛固定。将HistoGel 加热到60 ℃熔解,离心去除拟胚体中的固定液,把液态的HistoGel 加到拟胚体上,调整拟 胚体的相对位置使其相对集中,待胶冷却凝固,将含有拟胚体的胶块取出,进行常规的石蜡切片操作,包括脱水、透明、浸蜡、包 埋、切片和苏木素- 伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色。显微镜下观察拟胚体的形态,并用拟胚体的形态完好度来评判这种方法。结 果:HistoGel 仅在60 ℃便可熔解,室温可以冷却凝固,含有拟胚体的胶块在整个操作过程中很方便。展片过程中,石蜡和HistoGel 能够保持平整。HE 染色的结果可以看出,拟胚体内部结构完好,细胞核和细胞质清晰可辨。结论:HistoGel可以作为一种微量细 胞组织的预包埋胶制作石蜡切片,而且相比琼脂预包埋,HistoGel 因其操作更加方便和特有的物理特性显示出更多的优点。

关 键 词:HistoGel  微小组织  石蜡切片

Application of HistoGel Pre-embedding for Preparing Paraffin Sections of Microtissue
Abstract:
Keywords:HistoGel  Microtissue  Paraffin sections
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