| 小鼠骨髓来源肥大细胞的培养及鉴定 |
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| 引用本文： | 彭 霞,梁玉婷,林 堃,尹 悦,李 莉.小鼠骨髓来源肥大细胞的培养及鉴定[J].现代生物医学进展,2017,17(30):5807-5811. |
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| 作者姓名： | 彭 霞 梁玉婷 林 堃 尹 悦 李 莉 |
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| 作者单位： | 上海交通大学附属第一人民医院检验科 上海 200080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81471593, 81601395）；上海市青年扬帆计划（16YF1409200） |
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| 摘 要： | 目的:探讨小鼠骨髓来源肥大细胞体外大量培养及鉴定方法。方法:采用IL-3(10 ng/mL)和不同浓度的SCF联合刺激小鼠骨髓细胞,培养四周,采用普通光学显微镜观察细胞形态,牛鲍氏血细胞计数板进行细胞计数,甲苯胺蓝染色观察其胞浆颗粒物质,流式细胞仪检测细胞表面CD117和FcεRI的表达情况,β-己糖苷酶释放试验评估肥大细胞活化能力。结果:培养条件为10ng/mL IL-3和20 ng/mL SCF时,悬浮细胞数目能达到1×10~8细胞,其中CD117和FcεRI双阳性细胞比例达90%以上;甲苯胺蓝染色可见细胞胞浆含有大量紫红色颗粒;细胞经IgE-DNP致敏及DNP-HSA激发后,β-己糖苷酶释放率明显增加,且SCF能促进肥大细胞释放β-己糖苷酶。结论:采用10 ng/mL IL-3和20 ng/mL SCF诱导骨髓细胞能够获得大量高纯度的小鼠骨髓来源肥大细胞,为肥大细胞特性及功能学研究提供了基础。
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| 关 键 词： | 小鼠 骨髓 肥大细胞 培养 β-己糖苷酶释放 |
| 收稿时间： | 2017/4/22 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/5/18 0:00:00 |
Culture and Identification of Bone Marrow-derived Mast Cells in Mice |
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