| HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母的研究 |
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| 引用本文： | 周小玲,李子龙,孙平楠.HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母的研究[J].现代生物医学进展,2009,9(18). |
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| 作者姓名： | 周小玲 李子龙 孙平楠 |
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| 作者单位： | 1. 汕头大学医学院,广东,汕头,515041
2. 中科院北京微生物研究所,北京,100101 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,国家自然科学基金,广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:实现HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母.方法:分别将乙肝病毒前S1蛋白和绿色荧光蛋白克隆到表达载体pPIC9K,获得重组质粒pPIC9K-EGFP-preS1,Sac1位点酶切线性化,采用醋酸锂(LiAc)和二硫苏糖醇(DDT)对巴斯德毕赤氏酵母Pichia Pastoris GS115预处理,在电压1.5 kv、电容25 F条件下进行电击转化.电击后立即迅速稀释在冰预冷的1 M的山梨醇中,混匀后取100 l的菌液均匀涂布YNBG平板,利用HIS4标记筛选转化子.结果:发现改进后的转化方法pPIC9K-EGFP-preS1的转化率提高到164×10 4个转化子/1μgpPIC9K-EGFP-preS1 DNA,是传统方法的6.6倍.结论:采用改进后的方法能有效的提高质粒pPIC9K-EGFP-preS1的转化率,为筛选高表达HBV PreS-EGFP融合蛋白的转化子打下基础.
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| 关 键 词： | 乙肝病毒前S1蛋白 高效转化 毕赤氏酵母 |
Study on Efficient Transformation of Fusion Expression Plasmid of HBV PreS1-EGFP into Pichia Pastoris |
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| ZHOU Xiao-ling,LI Zi-long,SUN Ping-nan.Study on Efficient Transformation of Fusion Expression Plasmid of HBV PreS1-EGFP into Pichia Pastoris[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(18). |
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| Authors: | ZHOU Xiao-ling LI Zi-long SUN Ping-nan |
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