| 小鼠EVL 基因的克隆和真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 邹海,韩骅,高方,曹秀丽,徐骁.小鼠EVL 基因的克隆和真核表达载体的构建[J].现代生物医学进展,2012,12(24):4606-4610. |
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| 作者姓名： | 邹海 韩骅 高方 曹秀丽 徐骁 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室 陕西西安710032
2. 第四军医大学基础部神经生物学教研室 陕西西安710032 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973项目)资助(001CB509906);国家自然科学基金资助项目(30200148) |
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| 摘 要： | 目的:构建小鼠EVL(Ena/VASP like)基因的真核表达载体,为深入研究EVL的功能奠定基础.方法:采用PCR方法,从小鼠cDNA文库中,扩增出1245bp的EVL编码区片段,经电泳、胶回收后连接入pMD- 18T载体中,测序鉴定正确.用BamHI和HincⅡ双酶切,定向克隆EVL编码区片段到真核表达载体pcDNA3.1中,用限制性内切酶酶切鉴定重组质粒正确后.将重组质粒转染入HELA细胞中,以RT-PCR检测EVL的mRNA的表达,以Western Blot检测EVL蛋白的表达.结果:酶切鉴定结果显示小鼠EVL编码区基因被成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1中；RT-PCR和Western Blot结果以及免疫荧光染色显示Hela细胞中有EVL的mRNA和蛋白的表达.结论:成功获得pcDNA3.1 -EVL的真核表达载体,为进一步深入研究EVL蛋白的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | EVL蛋白 基因克隆 真核表达 |
Clone of EVL and Construction of EVL Eukaryotic Expression Plasmid |
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| ZOU Hai,HAN Hu,GAO Fang,CAO Xiu-li,XU Xiao.Clone of EVL and Construction of EVL Eukaryotic Expression Plasmid[J].Progress in Modern Biomedicine,2012,12(24):4606-4610. |
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| Authors: | ZOU Hai HAN Hu GAO Fang CAO Xiu-li XU Xiao |
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| Institution: | 1 Department of Medical Genetics and Development Biology,The Fourth Military Medical University,Xi’an,Shaanxi,710032,China; 2 Institute of Neurosciences,The Fourth Military Medical University,Xi’an,Shaanxi,710032,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | EVL protein Gene cloning Eukaryotic expression |
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