鸡马立克病病毒Meq蛋白抑制p53的转录激活作用

目的　构建马立克病病毒野生型Meq基因（Meq-wt）和p53结合区域缺失的突变型Meq基因（Meq-mut）表达质粒，研究Meq蛋白对p53的转录激活功能的影响，为进一步了解其生物学功能奠定基础。方法 采用PCR方法克隆马立克氏病毒Meq-wt基因，并采用突变PCR方法缺失Meq与p53结合区域，分别构建了Meq-wt和Meq-mut基因表达质粒。转染鸡胚成纤维细胞（CEF）后，用western印迹法检测Meq蛋白的表达，利用荧光素酶报告基因系统证实Meq蛋白对p53转录激活的抑制作用。同时借助免疫荧光技术，采用荧光显微镜观察Meq蛋白与p53蛋白在细胞中的定位。结果 DNA序列测序表明克隆的Meq-wt、Meq-mut基因插入位点和核苷酸序列完全正确。荧光素酶报告基因系统证实Meq蛋白对p53转录激活的具有明显的抑制作用。间接免疫荧光试验证实野生型Meq蛋白主要在胞浆中表达，而缺失与p53结合区域的突变型Meq在胞浆/胞核中均有表达。野生型Meq蛋白与内源性p53蛋白在胞核内能够很好地重合。 结论 Meq蛋白对p53的转录激活具有抑制作用，可能是通过直接与p53相互结合，来抑制对p53转录活性功能。

Meq protein of Marek's disease virus inhibits the transactivity of p53