| 重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备 |
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| 引用本文： | 陈辉,高娜,范东瀛,郑群,王娟,安静.重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备[J].微生物与感染,2010,5(3). |
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| 作者姓名： | 陈辉 高娜 范东瀛 郑群 王娟 安静 |
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| 作者单位： | 首都医科大学基础医学院微生物学教研室,北京,100069 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家"十一五"科技重大专项 |
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| 摘 要： | 本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C。融合蛋白经原核表达、纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备抗HCV-C多克隆抗体。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,蛋白免疫印迹(Westernblot)和间接免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果显示,表达HCV-C的原核表达质粒pQE31-HCV-C构建正确,获得相对分子质量约22000的纯化融合蛋白。ELISA检测重组蛋白免疫小鼠的抗血清效价达1:12800。结果显示,自制的抗HCV-C多克隆抗体能特异性识别HCV-C。本研究获得了纯度较好、原核表达的HCV-C,并成功制备了抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C的致病机制提供了有实用价值的研究工具。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 核心蛋白 原核表达 抗体制备 |
Prokaryotic expression and purification of hepatitis C virus core protein(HCV-C) and preparation of polyclonal antibodies against HCV-C |
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| CHEN Hui,GAO Na,FAN Dong-Ying,ZHENG Qun,WANG Juan,AN Jing.Prokaryotic expression and purification of hepatitis C virus core protein(HCV-C) and preparation of polyclonal antibodies against HCV-C[J].Journal of Microbes and Infection,2010,5(3). |
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| Authors: | CHEN Hui GAO Na FAN Dong-Ying ZHENG Qun WANG Juan AN Jing |
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