| miR-252-5p通过靶向调控保幼激素酸甲基转移酶基因JHAMT的表达而影响果蝇变态发育 |
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| 引用本文： | 张泽麟,嵇杰,徐文雨,刘卓,范晓春,邓昌鑫,何倩毓.miR-252-5p通过靶向调控保幼激素酸甲基转移酶基因JHAMT的表达而影响果蝇变态发育[J].昆虫学报,2022,65(7):799-806. |
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| 作者姓名： | 张泽麟 嵇杰 徐文雨 刘卓 范晓春 邓昌鑫 何倩毓 |
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| 作者单位： | (黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院, 黑龙江大庆 163319) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31970465)；;黑龙江省博士后科研启动基金(LBH-Q19165)； |
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| 摘 要： | 【目的】保幼激素酸甲基转移酶(juvenile hormone acid methyl transferase, JHAMT)是保幼激素(juvenile hormone, JH)合成通路中的关键限速酶。本研究旨在筛选并验证靶向调控黑腹果蝇Drosophila melanogaster JHAMT转录表达的miRNA，揭示miRNA在JH生物合成中的作用机理。【方法】首先通过miRanda, TargetScan和microT-CDS在线网站对靶向黑腹果蝇JHAMT的miRNA进行预测，取3个网站均能预测到的miRNA作为候选靶向JHAMT的miRNA；利用双荧光素酶系统对候选miRNA与JHAMT的靶向关系进行验证；qRT-PCR检测候选miRNA与JHAMT在黑腹果蝇生长发育中的表达模式；利用qRT-PCR和果蝇GAL4-UAS系统分别检测黑腹果蝇咽侧体中超表达miRNA对JHAMT的表达以及对黑腹果蝇变态发育的影响。【结果】 miRanda, TargetScan和microT-CDS分别预测到5, 18和16个靶向JHAMT的miRNA，共同预测到4个miRNA，分别是miR-252-5p, miR-277-3p, miR-1002-5p和miR-987-5p。双荧光素酶检测结果表明，miR-252-5p mimics可显著降低野生型JHAMT 3′UTR荧光素酶报告基因载体所表达的荧光素酶活性，而JHAMT 3′UTR区中miR-252-5p结合位点突变后，该抑制作用被解除。qRT-PCR检测结果表明，miR-252-5p与JHAMT在黑腹果蝇卵、幼虫及预蛹期的转录表达模式相反。咽侧体中超表达miR-252后，可显著降低JHAMT和JH初级反应基因Kr-h1的表达水平；且表现出类似JH缺失的表型，如化蛹时间推迟、体重变轻以及蛹期死亡增加。【结论】miR-252-5p可通过靶向作用于JHAMT参与JH生物合成调控，从而影响果蝇变态发育。
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| 关 键 词： | 黑腹果蝇 miRNA 靶基因 保幼激素甲基转移酶 miR-252-5p 变态发育 |
miR-252-5p affects metamorphosis by targetedly regulating the expression of juvenilehormone acid methyl transferase geneJHAMTinDrosophila |
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| ZHANG Ze-Lin,JI Jie,XU Wen-Yu,LIU Zhuo,FAN Xiao-Chun,DENG Chang-Xin,HE Qian-Yu.miR-252-5p affects metamorphosis by targetedly regulating the expression of juvenilehormone acid methyl transferase geneJHAMTinDrosophila[J].Acta Entomologica Sinica,2022,65(7):799-806. |
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| Authors: | ZHANG Ze-Lin JI Jie XU Wen-Yu LIU Zhuo FAN Xiao-Chun DENG Chang-Xin HE Qian-Yu |
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| Institution: | (College of Life Science and Biotechnology, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing, Heilongjiang 163319, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Drosophila melanogaster miRNA target gene juvenile hormone acid methyl transferase miR-252-5p metamorphosis |
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